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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
子宮內(nèi)膜正常蛻膜化對(duì)胚胎植入至關(guān)重要,該過(guò)程涉及子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖分化等復(fù)雜環(huán)節(jié)。已有報(bào)道證實(shí)slp-2(Stomatin likeprotein-2)參與調(diào)控細(xì)胞增殖分化,提示其在子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化過(guò)程中可能有一定的調(diào)控作用,而目前未見相關(guān)報(bào)道,本研究以昆明小鼠為實(shí)驗(yàn)材料,建立小鼠早期妊娠、假孕、人工誘導(dǎo)蛻膜化的動(dòng)物模型,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR,免疫印跡和免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)小鼠胚胎圍著床期子宮內(nèi)膜slp-2
2、的表達(dá)規(guī)律,并初步探討了其對(duì)子宮蛻膜化進(jìn)程的影響。
方法:
1.以性成熟昆明雌鼠與雄鼠或結(jié)扎雄鼠交配,得到妊娠小鼠或假孕小鼠;利用宮角注射玉米油,構(gòu)建人工誘導(dǎo)蛻膜化動(dòng)物模型。
2.利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、免疫印跡、免疫組織化學(xué)對(duì)slp-2 mRNA和蛋白在小鼠圍著床期子宮內(nèi)膜的表達(dá)規(guī)律進(jìn)行檢測(cè)。
3.利用宮角注射技術(shù),以反義寡核苷酸沉默slp-2的表達(dá),借助人工誘導(dǎo)蛻膜化模型,觀察slp-2對(duì)小鼠
3、子宮內(nèi)膜蛻膜化進(jìn)程的影響。
結(jié)果:
1.slp-2在小鼠圍著床期子宮內(nèi)膜的表達(dá)具有時(shí)空特異性,slp-2 mRNA和蛋白在小鼠孕5天(d5)至孕8天(d8)高表達(dá),而假孕小鼠未見類似表達(dá)高峰;其在小鼠子宮內(nèi)膜中的定位隨著蛻膜化進(jìn)程的發(fā)展發(fā)生變化。
2.宮角注射slp-2反義寡核苷酸(A-ODNs)沉默slp-2在小鼠子宮內(nèi)膜的表達(dá)之后,與注射slp-2正義寡核苷酸(S-ODNs)對(duì)照組相比,注射A-ODNs
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