CD63基因在小鼠圍著床期子宮中的表達(dá)和調(diào)節(jié).pdf

1、胚胎著床是一個(gè)復(fù)雜的過程，需要活化的胚泡與進(jìn)入接受態(tài)的子宮內(nèi)膜之間建立聯(lián)系。在嚙齒類動物，著床過程啟動后，子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞發(fā)生廣泛的蛻膜化，為接下來的胚胎及胎盤發(fā)育做準(zhǔn)備。胚胎著床和子宮蛻膜化受到很多因素調(diào)控，但具體的分子機(jī)理仍不清楚。我們實(shí)驗(yàn)室利用基因表達(dá)系列分析(SAGE)技術(shù)發(fā)現(xiàn)，與非著床位點(diǎn)相比，CD63(CD63 antigen)基因在小鼠的著床位點(diǎn)顯著上調(diào)。 CD63屬于四次跨膜蛋白超家族，在人黑色素瘤等多種腫瘤發(fā)展

2、中起重要作用，被稱為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因子。本實(shí)驗(yàn)利用原位雜交、實(shí)時(shí)定量RT-PCR、Westernblot和熒光素酶活性分析等方法，研究了CD63基因在圍著床期小鼠子宮中的表達(dá)與調(diào)節(jié)。CD63的mRNA和蛋白水平在妊娠第5天子宮的著床位點(diǎn)均顯著上調(diào)，在隨后第6-8天的蛻膜區(qū)，均可檢測到明顯的CD63 mRNA表達(dá)信號。在假孕和延遲著床的子宮中，檢測不到CD63基因的表達(dá)，而在延遲激活子宮的著床位點(diǎn)，CD63基因的表達(dá)特異性增強(qiáng)，其表達(dá)模式與

3、正常妊娠第5天著床位點(diǎn)處類似。CD63 mRNA在小鼠妊娠第6-8天的蛻膜區(qū)表達(dá)，同時(shí)在人工誘導(dǎo)蛻膜化的小鼠子宮中也能檢測到CD63基因的雜交信號，實(shí)時(shí)定量RT-PCR也驗(yàn)證了此結(jié)果，提示CD63基因可能在蛻膜化過程發(fā)揮作用。在切除卵巢的小鼠中，類固醇激素對CD63在子宮內(nèi)的表達(dá)沒有影響。體外誘導(dǎo)蛻膜化中，CD63 mRNA表達(dá)持續(xù)上調(diào)。CD63基因啟動子上存在轉(zhuǎn)錄因子C/EBPβ反應(yīng)元件，將含有CD63基因啟動子序列的報(bào)告載體轉(zhuǎn)染體外