ATP合酶F-,0-復(fù)合體c亞基基因在小鼠早期妊娠子宮中的表達(dá)與調(diào)節(jié).pdf

1、胚胎著床是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，需要活化的胚泡與進(jìn)入接受態(tài)的子宮內(nèi)膜之間建立聯(lián)系。在嚙齒類(lèi)動(dòng)物，著床過(guò)程啟動(dòng)后，子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞發(fā)生廣泛的蛻膜化，為接下來(lái)的胚胎及胎盤(pán)發(fā)育做準(zhǔn)備。近年來(lái)隨著基因芯片技術(shù)的迅速發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)了許多與著床以及蛻膜化等相關(guān)的基因，但關(guān)于著床的分子機(jī)理仍然不清楚。ATP合酶F0復(fù)合體c亞基(ATPsynthase，H+transporting，mitochondrialF0complex，subunitc，Atp5g)

2、是線粒體功能的重要組成部分，該亞單位由三個(gè)核基因共同編碼，分別是ATP合酶F0復(fù)合體c亞基1(Atp5g1)、Atp5g2和Atp5g3。我們實(shí)驗(yàn)室利用基因芯片發(fā)現(xiàn)，與非著床位點(diǎn)相比，Atp5g3基因在小鼠的著床位點(diǎn)顯著上調(diào)。本實(shí)驗(yàn)利用原位雜交檢測(cè)了ATP合酶F0復(fù)合體c亞基的三個(gè)基因(Atp5g1、Atp5g2和Atp5g3)在圍著床期小鼠子宮中的表達(dá)，并利用假孕、延遲著床及激素處理等模型，研究了這些基因在子宮中的表達(dá)與調(diào)節(jié)，同時(shí)通過(guò)

3、構(gòu)建啟動(dòng)子活性報(bào)告載體，研究了雌激素對(duì)Atp5g3基因表達(dá)的調(diào)節(jié)。 在小鼠妊娠第5天子宮的著床位點(diǎn)、第7-8天的次級(jí)蛻膜區(qū)及發(fā)育的胚胎中，均可檢測(cè)到明顯的Atp5g1、Atp5g2和Atp5g3mRNA表達(dá)信號(hào)。但在假孕和延遲著床的子宮中，均檢測(cè)不到這三個(gè)基因的表達(dá)。當(dāng)用雌激素處理啟動(dòng)胚胎著床后，在胚胎著床位點(diǎn)能夠檢測(cè)到這三個(gè)基因的特異性表達(dá)，其表達(dá)模式與正常妊娠第5天著床位點(diǎn)處類(lèi)似。在人工誘導(dǎo)蛻膜化模型中，在對(duì)照側(cè)的小鼠子宮角

4、中檢測(cè)不到Atp5g1、Atp5g2和Atp5g3mRNA表達(dá)，但在注油的人工誘導(dǎo)蛻膜化的小鼠子宮角中，可檢測(cè)這三個(gè)基因在蛻膜細(xì)胞中強(qiáng)表達(dá)。在卵巢切除后注油的對(duì)照組小鼠子宮中，未檢測(cè)到這三個(gè)基因的表達(dá)，雌激素處理可以明顯刺激Atp5g1、Atp5g2和Atp5g3基因在小鼠子宮腔上皮和腺上皮中的表達(dá)，而雌激素與其受體拮抗劑共同處理能夠抑制雌激素對(duì)這些基因表達(dá)的誘導(dǎo)效應(yīng)。將含有Atp5g3基因啟動(dòng)子序列的報(bào)告載體轉(zhuǎn)染入體外培養(yǎng)的原代小鼠子