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1、胚胎著床是妊娠建立的關(guān)鍵步驟,目前在人和嚙齒類動(dòng)物中,著床機(jī)理的研究很多,反芻動(dòng)物研究相對(duì)滯后。Tagln2是一種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白,通過(guò)影響微絲的聚合來(lái)調(diào)節(jié)微絲骨架,進(jìn)而參與調(diào)節(jié)相關(guān)的細(xì)胞功能,例如:細(xì)胞增殖、分化、遷移、凋亡等。我們以前的研究表明:Tagln2參與小鼠和兔子的胚胎著床,表達(dá)于圍著床期小鼠和兔的腔上皮和腺上皮。在山羊胚胎著床中,Tagln2是否發(fā)揮作用是值得研究的問(wèn)題。
目的:檢測(cè)細(xì)胞骨架蛋白Tagln2在山羊
2、早期妊娠、發(fā)情周期和激素處理子宮中的表達(dá),以確定其是否與山羊胚胎著床相關(guān)以及是否受類固醇激素調(diào)控。
材料與方法:以黑龍江本地山羊?yàn)椴牧?,分別取發(fā)情周期第0、9、12、16天的子宮組織,早期妊娠第6、9、12、15、22、25、30、40、50、60天的子宮組織,以及雙側(cè)卵巢切除康復(fù)兩個(gè)月后用雌激素、孕酮、雌激素和孕酮共同處理、油處理(對(duì)照)的子宮組織。采用原位雜交及Western blot方法,檢測(cè)Tagln2在早期妊娠、發(fā)情
3、周期和激素處理的山羊子宮中的表達(dá)方式及其類固醇激素調(diào)控。
結(jié)果:在發(fā)情周期的山羊子宮中,Tagln2 mRNA主要在子宮腔上皮和腺上皮中表達(dá)。整個(gè)發(fā)情周期均檢測(cè)到Tagln2 mRNA信號(hào),在發(fā)情第9天其信號(hào)較強(qiáng)。Western blot檢測(cè)到Tagln2蛋白在整個(gè)發(fā)情周期山羊子宮中均表達(dá),并且在發(fā)情周期中第9天表達(dá)量最高。
在山羊早期妊娠過(guò)程中,Tagln2 mRNA同樣在子宮腔上皮和腺上皮中表達(dá)。隨著妊娠的進(jìn)行T
4、agln2 mRNA信號(hào)逐漸增強(qiáng),尤其妊娠第25天以后Tagln2 mRNA在母胎界面信號(hào)越來(lái)越強(qiáng),并且在子宮肉阜(胚胎與子宮粘附位點(diǎn))顯著高于非子宮肉阜。Tagln2蛋白表達(dá)與mRNA基本相符,隨著妊娠的進(jìn)行Tagln2蛋白表達(dá)明顯上調(diào)。
類固醇激素處理模型中,原位雜交和Western blot均顯示孕酮上調(diào)Tagln2表達(dá),雌激素則沒(méi)有明顯影響。
結(jié)論:原位雜交和Western blot的結(jié)果表明Tagln2的表
5、達(dá)呈現(xiàn)胚胎著床特異性,Tagln2表達(dá)于山羊胚胎著床期的子宮腔上皮和腺上皮中,并且隨著著床和胎盤形成的進(jìn)行,表達(dá)逐漸增強(qiáng)。推測(cè)Tagln2參與山羊胚胎著床和胎盤形成的過(guò)程。孕酮上調(diào)Tagln2的表達(dá),雌激素對(duì)其表達(dá)無(wú)明顯影響。
Tagln2是高度保守的蛋白,在不同物種胚胎著床中都發(fā)揮作用,提示這個(gè)分子,可能以相同的機(jī)制參與不同種動(dòng)物(小鼠、山羊、兔子)的胚胎著床。因此,Tagln2的作用機(jī)制值得深入研究。本實(shí)驗(yàn)為研究反芻動(dòng)物胚
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