雌激素對子宮內(nèi)膜異位癥子宮內(nèi)膜細胞EGF、EGFR基因及蛋白表達的影響.pdf

1、分類號：R 7 1密 級：學(xué)位類別： 科學(xué)學(xué)位團 專業(yè)學(xué)位口學(xué)校代碼：100 62學(xué) 號：2 0 1 0 6 0 2 4 4 3學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)又肄眚科矢號碩士學(xué)位論文M A S T E R ’S D I S S E R T A T I o N論文題目：雌激素對子宮內(nèi)膜異位癥子宮內(nèi)膜細胞E G F 、E G F R 基因及蛋白表達的影響T IT L E E f f o r t so f e s t r o g e no nt h ee x

2、 p r e s s i o no f E G F &E G F R g e n e a n d p r o t e i nf o re n d o m e t r i a lc e l l s一級學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué)二級學(xué)科：婦產(chǎn)科學(xué)論文作者：盛威指導(dǎo)教師：尹利榮天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一三年五月天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要目的：本研究通過建立在位、異位內(nèi)膜細胞原代培養(yǎng)模型，對原代培養(yǎng)的異位和在位子宮內(nèi)膜細胞進行形態(tài)學(xué)觀察，同時

3、予以不同濃度、不同時間雌激素刺激，觀察E G F 及E G F R 基因及蛋白表達的變化情況，從而了解內(nèi)異癥中E G F 、E G F R 表達與雌激素的關(guān)系。方法：實驗標(biāo)本來自天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院婦科因內(nèi)異癥行手術(shù)治療患者的異位內(nèi)膜組織作異位內(nèi)膜組( 1 7 例) ，同時取因子宮肌瘤合并內(nèi)異癥行子宮切除手術(shù)治療患者的內(nèi)膜作為在位內(nèi)膜組( 1 7 例) ，同期住院的因子宮肌瘤行手術(shù)治療患者的子宮內(nèi)膜作對照組( 1 7 例) ，進行細胞培

4、養(yǎng)，對原代培養(yǎng)的異位和在位子宮內(nèi)膜細胞進行形態(tài)學(xué)觀察。各組細胞干預(yù)方法：①各組細胞給予不同濃度( 1 0 q 、1 0 。6 、1 0 一、1 0 ‘1 0m m o l ／L ) 雌激素培養(yǎng)5 d ，確定雌激素最佳刺激濃度。②各組細胞予含最佳刺激濃度雌激素的培養(yǎng)基分別培養(yǎng)3 0 m i n ( 短效刺激) 和5 d( 長效刺激) 。用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色( M T T ) 法檢測各組細胞的增殖能力，同時應(yīng)用熒光定量P C R

5、技術(shù)檢測各組細胞中E G Fm R N A 及E G F R m R N A的表達水平，用E L I S A 從蛋白水平檢測E G F 及E G F R 蛋白的表達水平。結(jié)果：( 1 ) 體外培養(yǎng)內(nèi)異癥的異位內(nèi)膜細胞、在位內(nèi)膜細胞和對照組細胞生長曲線非常接近，各組細胞的倍增時間均出現(xiàn)在第3 d ，于第6 d 各組細胞的增殖能力均出現(xiàn)下降。在倒置顯微鏡下觀察，異位內(nèi)膜細胞與在位及對照組內(nèi)膜細胞的外觀特征相似，異位內(nèi)膜間質(zhì)細胞形態(tài)較在位及對

6、照組內(nèi)膜間質(zhì)細胞略小，分散生長，似紡錘狀。( 2 ) 雌激素刺激可提高異位內(nèi)膜細胞、在位內(nèi)膜細胞及對照組細胞的增殖能力，并隨著雌激素刺激濃度的增加，各組細胞的增殖能力均增強。( 3 ) 異位及在位內(nèi)膜細胞E G F 、E G F R 基因及蛋白表達較對照組內(nèi)膜細胞這兩者表達均增高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義( P0 ．0 5 ) 。結(jié)論：( 1 ) 選擇在位、異位內(nèi)膜細胞原代培養(yǎng)模型，是一種可靠的方法，所得實驗結(jié)果具有參考價值。( 2 ) 雌激