姜黃素抑制子宮內(nèi)膜異位癥雌激素生成的實驗研究.pdf_第1頁
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1、湖北中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文姜黃素抑制子宮內(nèi)膜異位癥雌激素生成的實驗研究姓名:余崢申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):中西醫(yī)結(jié)合臨床指導(dǎo)教師:張昌軍20100516構(gòu)開始變形,致密的腺上皮細胞結(jié)構(gòu)開始松散;3d后部分腺上皮細胞變形崩解,偶有間質(zhì)細胞壞死。傳代后,間質(zhì)細胞形態(tài)清晰可辨,腺上皮細胞失去正常形態(tài)難以辨認(rèn)。細胞貼壁法成功率為非EMT組83%,EMT組為78%,腺上皮細胞傳代未成功,間質(zhì)細胞傳代至第4代。3、用離心法和篩網(wǎng)法分離培養(yǎng)內(nèi)膜細胞,篩

2、網(wǎng)分離法所得的細胞純度明顯高于細胞離心法。電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測第3代間質(zhì)細胞和第1代腺上皮細胞培養(yǎng)液上清中E:水平,非EMT組間質(zhì)細胞的E:水平為087113pg/ml,腺上皮細胞E:水平為106049pg/ml;EMT組間質(zhì)細胞的Ez水平為934137pg/m1,腺上皮細胞E:水平為1290065pg/ml。4、混合培養(yǎng)內(nèi)膜細胞,用電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測非EMT組和EMT組原代細胞培養(yǎng)液上清中E:生成水平。非EMT組內(nèi)膜細胞分泌的E:水

3、平為134157pg/ml,EMT組內(nèi)膜細胞E:分泌水平為1682104pg/ml。結(jié)果顯示,EMT組E:分泌水平明顯高于非EMT組,混合培養(yǎng)EMT內(nèi)膜細胞組明顯高于分離培養(yǎng)EMT組。5、混合培養(yǎng)EMT組內(nèi)膜細胞,5o“mol/L的姜黃素干預(yù)后的EMT內(nèi)膜細胞分泌E:的水平明顯下降,24h、48h、72h和96h的E:生成水平分別較前一時間點增長3318%、5728%、388o%和1245%。10umol/L的姜黃素干預(yù)后的EMT內(nèi)膜細

4、胞E:的生成水平隨著時間的延長而增加,24h、48h、72h和96h雌激素生成的水平分別較前一時間點增長227%、349%、403%、476%。結(jié)果顯示,Cur干預(yù)后的EMT內(nèi)膜細胞較未干預(yù)前E:的生成水平均有所下降。其中,50“mol/L的姜黃素在作用96h后,內(nèi)膜細胞E:生成水平最低,呈現(xiàn)時間依賴性改變。不同劑量的姜黃素干預(yù)后內(nèi)膜細胞E:生成水平隨著藥物劑量的增大而分泌下降,呈現(xiàn)劑量依賴性改變。結(jié)論:1、通過改良細胞消化法和組織塊貼

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