丙泊酚對(duì)2型糖尿病大鼠缺血-再灌注心肌自噬的作用.pdf

1、目的：2型糖尿病的發(fā)病率及死亡率逐年攀升，心血管疾病是2型糖尿病患者最常見的并發(fā)癥和死亡原因，嚴(yán)重威脅人類健康。急性心肌梗死后溶栓治療的死亡率比較，糖尿病患者是非糖尿病患者的4-6倍。丙泊酚是臨床常用的靜脈麻醉劑，能夠通過(guò)改善心肌細(xì)胞能量代謝，抑制氧自由基，拮抗脂質(zhì)過(guò)氧化，保護(hù)心肌細(xì)胞。細(xì)胞自噬是將細(xì)胞內(nèi)受損、變性或衰老的蛋白質(zhì)以及細(xì)胞器運(yùn)輸?shù)饺苊阁w內(nèi)進(jìn)行消化降解的過(guò)程。基礎(chǔ)適量的自噬有利于維持心肌細(xì)胞正常的的功能和活性，相反，過(guò)量的自

2、噬會(huì)導(dǎo)致溶酶體降解細(xì)胞內(nèi)正常的蛋白質(zhì)甚至細(xì)胞器，導(dǎo)致心肌細(xì)胞損傷。近年，有研究表明，丙泊酚能通過(guò)調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞自噬，減輕大鼠急性心肌缺血-再灌注損傷。然而，丙泊酚對(duì)2型糖尿病心肌缺血-再灌注時(shí)自噬的影響還鮮有報(bào)道。本研究采用高脂高糖飼料（HFD）喂養(yǎng)結(jié)合腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ），制備2型糖尿病大鼠模型，結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支制備在體大鼠心肌缺血-再灌注損傷模型，探討丙泊酚對(duì)2型糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注時(shí)自噬的作用及作用機(jī)制，為丙泊酚的

3、臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　方法：42只健康成年雄性SD大鼠，6~8周齡，體重200~220 g，HFD喂養(yǎng)8周聯(lián)合腹腔注射STZ30mg/kg，誘導(dǎo)2型糖尿病大鼠模型，并隨機(jī)分為6組（n=7）：假手術(shù)組（Ⅰ組）、心肌缺血-再灌注損傷組（Ⅱ組）、心肌缺血-再灌注損傷-丙泊酚低劑量組（Ⅲ組）、心肌缺血-再灌注損傷-丙泊酚中劑量組（Ⅳ組）、心肌缺血-再灌注損傷-丙泊酚高劑量組（Ⅴ組）、心肌缺血-再灌注損傷-雷帕霉素組（Ⅵ組）。結(jié)扎左冠

4、狀動(dòng)脈前降支30min，再灌注120min制備大鼠心肌缺血-再灌注損傷模型。Ⅰ組只穿線不結(jié)扎，Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅵ組靜脈持續(xù)輸注生理鹽水3ml·kg-1·h-1，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組靜脈分別于結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支前10min靜脈持續(xù)輸注丙泊酚6、12、24mg·kg-1·h-1，Ⅵ組于左冠狀動(dòng)脈結(jié)扎前30分鐘腹腔注射雷帕霉素2mg/kg。記錄冠脈結(jié)扎前、結(jié)扎30min及再灌注120min時(shí)心率（HR）、左心室壓（LVSP）、左心室內(nèi)壓最大上升及下降速

5、率(±dp/dtmax)；檢測(cè)再灌注120min時(shí)血清磷酸肌酸激酶（CK-MB）、肌鈣蛋白T（cTnT）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）濃度；取左冠狀動(dòng)脈支配區(qū)域心肌組織，透射電鏡觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變；Western blot法檢測(cè)微管相關(guān)蛋白1輕鏈3（LC3Ⅱ），雷帕霉素靶蛋白(mTOR)以及磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)表達(dá)水平。
　　結(jié)果：結(jié)扎前各組大鼠HR、LVSP、±dp/dtmax差異無(wú)顯著性；與

6、結(jié)扎前比較，結(jié)扎30min時(shí)，除Ⅰ組外，其余各組HR、LVSP、±dp/dtmax均顯著性降低(P＜0.05)。與結(jié)扎30min時(shí)比較，再灌注120min時(shí)，除Ⅰ組外其余各組HR、LVSP、±dp/dtmax均進(jìn)一步顯著性降低(P＜0.05)。再灌注120min時(shí)，Ⅵ組HR、LVSP、±dp/dtmax顯著低于Ⅱ組，CK-MB、cTnT及MDA濃度顯著高于Ⅱ組，SOD濃度顯著低于Ⅱ組，LC3Ⅱ、mTOR表達(dá)顯著強(qiáng)于Ⅱ組，p-mTOR表達(dá)

7、顯著弱于Ⅱ組（P＜0.05），Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組 HR、LVSP、±dp/dtmax顯著高于Ⅱ組，CK-MB、cTnT及MDA濃度顯著低于Ⅱ組，SOD濃度顯著高于Ⅱ組，LC3Ⅱ、mTOR表達(dá)顯著弱于Ⅱ組，p-mTOR表達(dá)顯著強(qiáng)于Ⅱ組（P＜0.05），其中Ⅳ組最顯著，Ⅲ、Ⅴ組次之。
　　結(jié)論：丙泊酚可能通過(guò)上調(diào)p-mTOR表達(dá)、下調(diào)mTOR表達(dá)抑制心肌細(xì)胞自噬，減輕2型糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注損傷，其中以12mg·kg-1·h-1效果最