金葡素促進兔ACL重建后腱-骨愈合的組織學研究.pdf

1、目的：探討金葡素(金黃色葡萄球菌濾液制劑)對兔ACL重建后腱-骨愈合的影響。
　　 方法：采用自體趾長伸肌肌腱建立兔ACL重建動物模型,成年新西蘭大白兔24只隨機分為2組(實驗組和空白對照組),實驗組于脛骨隧道建立后立即向隧道內均勻注射金黃色葡萄球菌濾液制劑(金葡素,Highly Agglutinative Staphylococcin,HAS,一種能夠促進骨折愈合的生物制劑)0.2ml,分別于術畢及術后第2周于脛骨端腱-骨界面

2、再次均勻注射金葡素0.08ml.對照組以相同時間和方法注射等量0.9％Nacl注射液。分別于術后第4、8和12周各處死動物8只,自膝關節(jié)囊至脛骨結節(jié)下方橫斷取材,完整保留脛骨端骨隧道及移植肌腱,固定包埋后均行HE、VEGF免疫組化、苦味酸-天狼猩紅和甲苯胺藍染色,組織學評價腱-骨界面組織愈合情況。HE染色定性觀察腱.骨愈合程度,并以Yamakado分型方法進行評估；苦味酸-天狼猩紅染色定性評價腱-骨界面Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維增生、排列分布情況

3、；VEGF免疫組化染色定量評價腱.骨界面血管生成情況；甲苯胺藍染色定量評價腱-骨界面新骨生成情況。
　　 結果：實驗組術后第4周腱-骨界面由纖維結締組織填充,結合較為緊密,新生血管分布其間,成纖維細胞和成軟骨細胞增生活躍,膠原纖維含量不多、排列尚不規(guī)則。術后第8周腱-骨結合較緊密,膠原纖維大量生成,部分區(qū)域可見Sharpey’s纖維,形成間接止點,大量新生血管分布其間,肌腱周圍成骨明顯豐富,整個界面呈現(xiàn)新骨組織包圍肌腱并向內侵入

4、的趨勢。第12周移植肌腱與骨隧道之間形成典型的間接連接,可見Sharpey’s纖維排列有序,集結成束,血管生成較第8周有所減少,仍較豐富,新骨生成進一步增加,可見不成熟的纖維軟骨。Yamakado腱-骨界面形態(tài)學分型顯示術后第4、8和12周實驗組腱-骨界面愈合情況優(yōu)于對照組。實驗組在第12周有1個標本可觀察到典型的直接連接結構。組織定量學分析表明術后第4、8和12周實驗組新骨生成面積和新生血管所占比例均顯著高于對照組(p≤0.05)。通

5、過本實驗組織學研究及大量相關基礎和臨床研究可得,金葡素在多種成分(葡萄球菌腸毒素C、血漿游離凝固酶、蛋白質、多肽和氨基酸等)的共同作用下,能夠促進新生血管迅速長入腱-骨界面,豐富的血供一方面能夠為新骨和膠原纖維的生成提供豐富的營養(yǎng)物質和細胞因子,啟動骨代謝,激活骨細胞,加快骨壞死區(qū)的吸收與重建。同時也將大量的間充質細胞帶入腱-骨界面,通過增殖,分化為成纖維細胞、成軟骨細胞和成骨細胞。
　　 結論：金葡素能夠協(xié)同其多種成分的生物學