金葡素促進(jìn)兔ACL重建后腱-骨愈合的組織學(xué)研究.pdf

1、目的：探討金葡素(金黃色葡萄球菌濾液制劑)對兔ACL重建后腱-骨愈合的影響。
　　 方法：采用自體趾長伸肌肌腱建立兔ACL重建動(dòng)物模型,成年新西蘭大白兔24只隨機(jī)分為2組(實(shí)驗(yàn)組和空白對照組),實(shí)驗(yàn)組于脛骨隧道建立后立即向隧道內(nèi)均勻注射金黃色葡萄球菌濾液制劑(金葡素,Highly Agglutinative Staphylococcin,HAS,一種能夠促進(jìn)骨折愈合的生物制劑)0.2ml,分別于術(shù)畢及術(shù)后第2周于脛骨端腱-骨界面

2、再次均勻注射金葡素0.08ml.對照組以相同時(shí)間和方法注射等量0.9％Nacl注射液。分別于術(shù)后第4、8和12周各處死動(dòng)物8只,自膝關(guān)節(jié)囊至脛骨結(jié)節(jié)下方橫斷取材,完整保留脛骨端骨隧道及移植肌腱,固定包埋后均行HE、VEGF免疫組化、苦味酸-天狼猩紅和甲苯胺藍(lán)染色,組織學(xué)評價(jià)腱-骨界面組織愈合情況。HE染色定性觀察腱.骨愈合程度,并以Yamakado分型方法進(jìn)行評估；苦味酸-天狼猩紅染色定性評價(jià)腱-骨界面Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維增生、排列分布情況

3、；VEGF免疫組化染色定量評價(jià)腱.骨界面血管生成情況；甲苯胺藍(lán)染色定量評價(jià)腱-骨界面新骨生成情況。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組術(shù)后第4周腱-骨界面由纖維結(jié)締組織填充,結(jié)合較為緊密,新生血管分布其間,成纖維細(xì)胞和成軟骨細(xì)胞增生活躍,膠原纖維含量不多、排列尚不規(guī)則。術(shù)后第8周腱-骨結(jié)合較緊密,膠原纖維大量生成,部分區(qū)域可見Sharpey’s纖維,形成間接止點(diǎn),大量新生血管分布其間,肌腱周圍成骨明顯豐富,整個(gè)界面呈現(xiàn)新骨組織包圍肌腱并向內(nèi)侵入

4、的趨勢。第12周移植肌腱與骨隧道之間形成典型的間接連接,可見Sharpey’s纖維排列有序,集結(jié)成束,血管生成較第8周有所減少,仍較豐富,新骨生成進(jìn)一步增加,可見不成熟的纖維軟骨。Yamakado腱-骨界面形態(tài)學(xué)分型顯示術(shù)后第4、8和12周實(shí)驗(yàn)組腱-骨界面愈合情況優(yōu)于對照組。實(shí)驗(yàn)組在第12周有1個(gè)標(biāo)本可觀察到典型的直接連接結(jié)構(gòu)。組織定量學(xué)分析表明術(shù)后第4、8和12周實(shí)驗(yàn)組新骨生成面積和新生血管所占比例均顯著高于對照組(p≤0.05)。通

5、過本實(shí)驗(yàn)組織學(xué)研究及大量相關(guān)基礎(chǔ)和臨床研究可得,金葡素在多種成分(葡萄球菌腸毒素C、血漿游離凝固酶、蛋白質(zhì)、多肽和氨基酸等)的共同作用下,能夠促進(jìn)新生血管迅速長入腱-骨界面,豐富的血供一方面能夠?yàn)樾鹿呛湍z原纖維的生成提供豐富的營養(yǎng)物質(zhì)和細(xì)胞因子,啟動(dòng)骨代謝,激活骨細(xì)胞,加快骨壞死區(qū)的吸收與重建。同時(shí)也將大量的間充質(zhì)細(xì)胞帶入腱-骨界面,通過增殖,分化為成纖維細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞。
　　 結(jié)論：金葡素能夠協(xié)同其多種成分的生物學(xué)