轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿對(duì)家兔的慢性毒性實(shí)驗(yàn).pdf

1、隨著轉(zhuǎn)基因植物在全世界范圍內(nèi)的廣泛應(yīng)用，轉(zhuǎn)基因技術(shù)在給人類帶來諸多利益的同時(shí)，也存在一些潛在性的風(fēng)險(xiǎn)，有關(guān)轉(zhuǎn)基因生物安全性的討論也越來越為人們所關(guān)注。甜菜堿(betaine)是一類季銨化合物，能夠調(diào)節(jié)胞內(nèi)滲透壓，保護(hù)胞內(nèi)酶活性，穩(wěn)定細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)等，被認(rèn)為是許多植物細(xì)胞代謝相容的最好滲透保護(hù)物質(zhì)之一，甜菜堿醛脫氫酶(BADH)是合成甜菜堿的關(guān)鍵酶，在干旱和鹽脅迫下該酶活力顯著提高，從而大大增加甜菜堿的合成量。土地鹽堿化是制約我國(guó)糧食產(chǎn)量的主

2、要原因之一，鑒于苜蓿屬于鹽堿敏感型植物，因此構(gòu)建抗鹽堿的苜蓿新品種可以大大提高我國(guó)大部尤其是西北地區(qū)的土地利用率。苜蓿中轉(zhuǎn)入BADH基因會(huì)增強(qiáng)植株的抗鹽堿性，因此課題組采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)技術(shù)將BADH基因?qū)胲俎Ｊ荏w材料中苜1號(hào)的外植體中，獲得了PCR陽性植株。為觀察和比較轉(zhuǎn)BADH基因苜蓿對(duì)家兔生長(zhǎng)發(fā)育的影響，從而評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)BADH基因苜蓿的生物安全性，進(jìn)行了BADH基因苜蓿對(duì)家兔的慢性毒性試驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)以家兔為研究對(duì)象，將實(shí)驗(yàn)用兔隨機(jī)分成2組

3、，分別為正常對(duì)照組（50％非轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿+50％全價(jià)顆粒飼料）、轉(zhuǎn)基因苜蓿組（50％轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿+50％全價(jià)顆粒飼料），采用慢性毒理學(xué)的評(píng)價(jià)方法對(duì)兩組家兔連續(xù)飼喂22周并觀察實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的差異性。于實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，開始后第11周與第22周分三個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)定了兩組動(dòng)物的血常規(guī)，血生化指標(biāo)，并于實(shí)驗(yàn)開始后的第22周實(shí)驗(yàn)術(shù)期對(duì)兩組兔與生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的主要激素進(jìn)行了檢測(cè)，同時(shí)對(duì)兩組動(dòng)物的主要臟器（心、肝、脾、肺、腎、腸、睪丸）重量進(jìn)行稱量后計(jì)算比

4、較臟器指數(shù)，并且對(duì)主要臟器進(jìn)行了系統(tǒng)的組織病理學(xué)觀察，最后為比較轉(zhuǎn)基因苜蓿對(duì)家兔的腸道中菌群數(shù)量的影響，對(duì)兩組家兔直腸中糞球的菌落總數(shù)進(jìn)行了計(jì)數(shù)。結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組兔的血常規(guī)，血生化，血激素水平及臟器指數(shù)，腸道中的菌落總數(shù)指標(biāo)各個(gè)時(shí)期在統(tǒng)計(jì)學(xué)上均無顯著性差異(P＞0.05)，并且組織病理學(xué)觀察結(jié)果也無明顯差異。本實(shí)驗(yàn)表明外源性BADH基因的插入未改變苜蓿的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值或?qū)?dòng)物產(chǎn)生不良的影響，轉(zhuǎn)BADH基因苜蓿和非轉(zhuǎn)BADH基因苜蓿在動(dòng)