大米肽酶解工藝的優(yōu)化及抗氧化肽的分離鑒定.pdf

1、我國是稻谷生產大國，年產稻谷1.8億噸以上，約占世界總產量的42％。米渣是制糖工業(yè)的副產品，蛋白含量高達60％（干基）以上，但目前尚未被合理利用。大米蛋白經蛋白酶水解得到大米多肽，理化性質和功能均有明顯改善，大米多肽作為一種新型的蛋白資源，不僅能抗氧化、降血壓，還能增強機體免疫力，因此可以用來研發(fā)高附加值的產品。本課題以制糖工業(yè)的副產物米渣（超微粉碎至400目）為原料，對酶解工藝進行優(yōu)化，用粉末活性炭對酶解液進行脫色，并對大米多肽抗氧化

2、組分進行分離純化鑒定。主要研究結果如下:
　　(1)酶解工藝的優(yōu)化:以大米渣為原料，選用蛋白酶K對其進行酶解，確定最佳酶解工藝條件如下:料水比1∶7(g∶mL)，酶添加量6000 U/g，酶解時間6h，溫度60℃，起始pH8.0，此條件下大米多肽的轉化率為39.67％，氨基酸轉化率為4.31％，酶解產物主要是3～8個氨基酸組成的多肽混合物。
　　(2)粉末活性炭脫色:用粉末活性炭對大米蛋白酶解后的多肽液進行脫色，以脫色率和多

3、肽損失率為評價指標，確定最佳脫色條件為:脫色溫度55℃，脫色pH為3.0，活性炭添加量0.5％，脫色時間3h。此時脫色率為76.14％，多肽損失率為3.32％。
　　(3)放大及脫鹽實驗:放大實驗中多肽轉化率高達42.24％，氨基酸轉化率為5.97％，說明以優(yōu)化的酶解工藝條件進行放大生產具有可行性。用納濾方法脫鹽后，酸溶蛋白含量達到80.28％，灰分含量只有3.64％。
　　(4)抗氧化肽的分離鑒定:對大米蛋白酶解液進行生理

4、活性分析，發(fā)現其具有較強的抗氧化能力，尤其是分子量小于3 KDa的組分，當濃度達到40 mg/mL時，對DPPH自由基的清除率高達到96％。通過高效凝膠過濾、反相高效液相制備色譜和液質聯用等方法對其進行分離純化鑒定，最終得到抗氧化序列L-Q-P-Y(Leu-Gln-Pro-Tyr)，相對分子質量大小為519.27 Da?？寡趸腖-Q-P-Y清除DPPH自由基的能力與還原性谷胱甘肽相差不大，當濃度同為1 mg/mL時，抗氧化肽L-Q-P