2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩117頁(yè)未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、在藥物研發(fā)過(guò)程中,細(xì)胞水平測(cè)試是不可缺少的重要環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)的孔板細(xì)胞平臺(tái)過(guò)于簡(jiǎn)陋,只是使細(xì)胞靜態(tài)地暴露于藥物溶液中,忽略了細(xì)胞外微環(huán)境,更沒(méi)有涉及藥物在體內(nèi)吸收、分布、代謝和消除的特性,實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性極低,參考意義有限。微流控芯片內(nèi)單元構(gòu)件的尺度使它有可能同時(shí)容納分子,細(xì)胞,組織,甚至器官,而芯片特殊的流體精準(zhǔn)操控體系又使它能同時(shí)測(cè)量物理量,化學(xué)量和生物量,兼有體積小、消耗低、高通量等優(yōu)點(diǎn),被視為取代孔板的理想平臺(tái)。目前已報(bào)道的用于藥物篩

2、選的微流控裝置多為將不同組織來(lái)源的細(xì)胞進(jìn)行二維串、并聯(lián),尚未考慮藥物跨膜的過(guò)程,更沒(méi)有大量實(shí)際藥物測(cè)試數(shù)據(jù)支撐,仍處于概念階段。
  針對(duì)于已有藥物篩選芯片的不足,依據(jù)口服藥物的吸收代謝流程,本論文設(shè)計(jì)并構(gòu)建了一個(gè)立體多層(3D),集成多種細(xì)胞屏障(多元),具有多功能的微流控類器官藥物篩選芯片,用以在體外模擬藥物經(jīng)過(guò)口服后的吸收、分布、代謝和消除的過(guò)程。芯片從上至下依次集成了結(jié)腸癌細(xì)胞系(Caco-2)、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系(HUV

3、EC)、SD大鼠原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞、HUVEC、人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7、SD大鼠心臟、肺、脂肪組織和透析膜,此排列順序依照藥物在腸道被腸上皮絨毛吸收后,穿過(guò)毛細(xì)血管進(jìn)入血液,由肝門靜脈匯入肝臟,經(jīng)心臟輸送至全身,跨出毛細(xì)血管到達(dá)各個(gè)組織,最后經(jīng)腎臟排出的過(guò)程而設(shè)置。
  論文第一部分描述了芯片的設(shè)計(jì)及構(gòu)建,并對(duì)可行性進(jìn)行了驗(yàn)證。首先,分別考察了3D多元類器官芯片中各生物單元的功能。其次,利用熒光素鈉、普萘洛爾和葡聚糖的透過(guò)實(shí)驗(yàn),確立

4、了Caco-2和HUVEC細(xì)胞層的功能性以及芯片的密封性。隨后,利用環(huán)磷酰胺驗(yàn)證了SD大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞層的代謝能力。最后,通過(guò)染色鑒定了芯片中心臟、肺和脂肪組織的活性維持。
  第二部分描述了3D多元類器官芯片在藥物研發(fā)中的應(yīng)用。包括普萘洛爾和戊巴比妥在心臟、肺和脂肪組織中的分布;環(huán)磷酰胺,紫杉醇、5-氟尿嘧啶和埃博霉素B對(duì)MCF-7細(xì)胞的抑制作用;對(duì)乙酰氨基酚、普萘洛爾、環(huán)磷酰胺、紫杉醇、5-氟尿嘧啶和埃博霉素B引發(fā)的肝細(xì)胞損傷;

5、普萘洛爾、硫噴妥鈉、戊巴比妥和埃博霉素B在循環(huán)培養(yǎng)液中的濃度變化。多種經(jīng)典藥物的芯片測(cè)試結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有相同的趨勢(shì)物,由此證明,相對(duì)于傳統(tǒng)細(xì)胞平臺(tái),此基于微流控技術(shù)的多元3D芯片更適合于前期藥物篩選,其測(cè)試結(jié)果對(duì)隨后的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)具有一定的參考價(jià)值,可能有效提高藥物篩選的效率。
  第三部分對(duì)在3D多元類器官芯片測(cè)試中展現(xiàn)出優(yōu)秀抗腫瘤藥效的埃博霉素B的作用機(jī)制作了進(jìn)一步探討。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),作為微管蛋白穩(wěn)定劑的埃博霉素B衍生

6、物UTD1,在不同濃度下可使MCF-7和HT29細(xì)胞產(chǎn)生不同的狀態(tài):高濃度(800 nM)的UTD1能阻止有絲分裂,使細(xì)胞停滯于G2/M期,此時(shí)p21和Bax蛋白水平無(wú)顯著變換,但P53蛋白水平上調(diào),且定位于細(xì)胞質(zhì)中,caspase7酶原被激活,證明此時(shí)細(xì)胞凋亡機(jī)制啟動(dòng);而在較低濃度(50 nM)時(shí),UTD1誘導(dǎo)MCF-7和HT29細(xì)胞形成非整倍體并產(chǎn)生細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期,細(xì)胞中檢測(cè)到p21蛋白水平上調(diào),而B(niǎo)ax和P53蛋白水平

7、無(wú)顯著變化,但P53蛋白轉(zhuǎn)錄活性上調(diào),說(shuō)明P53轉(zhuǎn)錄活性提高并不依賴于蛋白水平的積累;P53蛋白在相同藥物帶來(lái)的不同細(xì)胞壓力下發(fā)揮出截然相反的作用,促進(jìn)被阻滯于G2/M期的細(xì)胞凋亡,而嘗試維持被阻滯于G0/G1期的細(xì)胞存活,這對(duì)于癌癥的治療可能不利。
  本文設(shè)計(jì)并構(gòu)建的微流控3D多元類器官藥物篩選芯片,可用以在體外測(cè)試藥物的ADME特性、肝細(xì)胞毒性和抗腫瘤活性試驗(yàn),其結(jié)果與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)具有相同趨勢(shì)的結(jié)果,完全優(yōu)于現(xiàn)有的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái),

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論