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文檔簡介
1、吡咯喹啉醌(PQQ)是參與氧化還原反應(yīng)的輔因子，作為許多酶的輔酶，如脫氫酶，氧化酶，水合酶與脫羧酶。PQQ含有能直接參與氧化還原反應(yīng)的鄰醌類結(jié)構(gòu)，以上酶蛋白可以催化非磷酸化的底物發(fā)生氧化反應(yīng)，如醇類，醛類和醛糖類。此外，PQQ還被認(rèn)為是繼吡啶和核黃素之后的第三類參與氧化還原反應(yīng)的輔因子。
限已知與PQQ合成相關(guān)的基因有7個(gè)，在生物體內(nèi)通常成基因簇。功能相近的基因具有一定同源性，并按一定順序排列為pqq基因簇。肺炎克雷伯氏菌
2、中， PQQ基因簇為一段pqqABCDEF的連續(xù)基因，約7Kb。本實(shí)驗(yàn)以肺炎克雷伯氏桿菌(K.pneumoniae DSM2026)編碼PQQ基因簇作為模板，本實(shí)驗(yàn)克隆了肺炎克雷伯氏菌中5.5kb的PQQ合成基因簇pqqABCDEF，利用不同啟動(dòng)子，分別以大腸桿菌與肺炎克雷伯氏菌為宿主生物合成PQQ。采用NBT（氧化型）-甘氨酸鉀溶液非酶系統(tǒng)測定PQQ含量。并利用無細(xì)胞體系原理用細(xì)胞破碎液合成PQQ。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明啟動(dòng)子影響PQQ合成，通
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