不同產(chǎn)地黑茶的化學(xué)指紋圖譜研究.pdf

1、黑茶屬于后發(fā)酵茶，是我國特有的茶類，主產(chǎn)地為湖南、四川、云南、廣西、湖北和陜西等省份。過去對黑茶質(zhì)量的評價主要是測定某些主要指標(biāo)成分的含量并結(jié)合感官審評;近年來，黑茶產(chǎn)品的產(chǎn)量和貿(mào)易量不斷增加，而不同產(chǎn)地黑茶的質(zhì)量參差不齊，將化學(xué)指紋圖譜技術(shù)應(yīng)用于對黑茶的研究能較好地體現(xiàn)黑茶的復(fù)雜性和整體性，能為對我國不同產(chǎn)地黑茶的鑒別和質(zhì)量評價提供參考。因此，本研究以我國6個黑茶主產(chǎn)地的108個黑茶樣品為研究對象，采用色譜和光譜分析方法，優(yōu)化了樣品的

2、提取、制備條件和色譜、光譜條件，建立了HPLC-DAD-ELSD同時測定茶葉中11種組分的分析方法，并分別初步建立了我國6個產(chǎn)地黑茶的HPLC-DAD、HPLC-ELSD和FTIR指紋圖譜共有模式。主要研究結(jié)果如下:
　　1.采用HPLC-DAD-ELSD聯(lián)用的檢測技術(shù)，分別初步建立了6個黑茶主產(chǎn)地及我國黑茶的HPLC-DAD和HPLC-ELSD指紋圖譜共有模式，其中針對黑茶中氨基酸類等組分紫外響應(yīng)弱的特點而研究建立的不同產(chǎn)地黑茶

3、的HPLC-ELSD指紋圖譜可作為對HPLC-DAD指紋圖譜的必要補充。研究了色譜分離條件和樣品提取條件的主要影響因素，確定色譜條件為:采用線性梯度洗脫，甲醇和0.1％的三氟乙酸水溶液為流動相，柱溫為30℃，DAD檢測波長為280nm，流動相的流速為1.0mL/min，ELSD的霧化氣體流速為2.8L/min，漂移管溫度為110℃;確定用于HPLC指紋圖譜分析的黑茶樣品提取條件為:用超純水作為提取溶劑，在90℃水浴下浸提15min，料液

4、比為1∶70。方法學(xué)考察表明精密度、重現(xiàn)性良好，黑茶樣品提取液在24h內(nèi)穩(wěn)定。根據(jù)平均相對保留時間、共有峰、平均相對峰面積和同源峰等對黑茶的HPLC指紋圖譜進(jìn)行了分析，其中在我國黑茶的HPLC-DAD指紋圖譜共有模式中共確定13個共有峰，在我國黑茶的HPLC-ELSD指紋圖譜共有模式中共確定10個共有峰，在湖南、四川、云南、廣西、湖北和陜西黑茶各自的HPLC-DAD和HPLC-ELSD指紋圖譜共有模式中分別確定了31、29、19、27、

5、26、24個和16、16、12、16、16、18個共有峰;不同產(chǎn)地黑茶中各共有峰的平均峰面積值和平均相對峰面積值均存在一定的差異。運用指紋圖譜相似度評價軟件對108個黑茶樣品與各自相應(yīng)產(chǎn)地的HPLC指紋圖譜共有模式間進(jìn)行了相似度比較，結(jié)果表明，除四川黑茶中的方包茶和湖南黑茶中的青磚茶外，其余102個黑茶樣品與各自相應(yīng)產(chǎn)地的HPLC指紋圖譜共有模式間的相似度均高于0.900，而18個對照茶樣與我國黑茶HPLC指紋圖譜共有模式間的相似度均低

6、于0.900。利用SPSS統(tǒng)計分析軟件對2012年生產(chǎn)的黑茶樣品的HPLC-DAD圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行了聚類分析，結(jié)果表明，當(dāng)臨界值為4時，來自不同產(chǎn)地的36個黑茶樣品可聚為6大類。
　　2.用茶葉中11種重要生物活性物質(zhì)的對照品溶液對各產(chǎn)地黑茶HPLC圖譜中的一些共有峰進(jìn)行了指認(rèn)。本研究中建立的色譜分析方法可用于對茶葉中兒茶素類、CAF（咖啡堿）、氨基酸類、GA（沒食子酸）等主要組分的同時分離檢測。
　　3.黑茶是一種復(fù)雜的混合物

7、體系，采用FTIR對不同產(chǎn)地的黑茶進(jìn)行研究，所反映的是黑茶中各混合組分分子吸收的疊加，只要黑茶中各組分的質(zhì)和量相對穩(wěn)定，樣品制各條件一致，其紅外光譜應(yīng)是相對穩(wěn)定的。研究了黑茶樣品的顆粒度、茶樣粉末與KBr的質(zhì)量比、掃描次數(shù)等因素對紅外光譜圖的影響，確定了樣品制備條件為:黑茶樣品粉末的顆粒度為過200目篩，茶樣粉末與KBr的質(zhì)量比為1∶100;確定掃描次數(shù)為32次;設(shè)置紅外光譜的分辨率為4 cm-1，掃描范圍為4000 cm-1～400

8、cm-1。比較了6個不同產(chǎn)地2011～2013年間生產(chǎn)的108個黑茶樣品的紅外光譜，并對各產(chǎn)地黑茶的FTIR指紋圖譜共有模式進(jìn)行了特征吸收峰歸屬的指認(rèn)和對比分析，結(jié)果表明，6個產(chǎn)地黑茶樣品的紅外光譜圖中共有14個共有峰;不同產(chǎn)地黑茶樣品的紅外光譜圖在1800 cm-1～700 cm-1波段中吸收峰數(shù)目、峰強度等均存在一定的差異;不同生產(chǎn)年份的黑茶，其紅外光譜圖較相似，但各共有峰的吸光度值存在差異，14個共有峰的吸光度值均隨生產(chǎn)年份越久而

9、逐漸降低。對不同產(chǎn)地黑茶紅外二階導(dǎo)數(shù)譜的相似度分析結(jié)果表明，相似度最高的為四川和陜西的黑茶，相似度為87.1％，相似度最低的為云南和陜西的黑茶，相似度為61.7％;不同產(chǎn)地黑茶各自的平均紅外二階導(dǎo)數(shù)譜與我國黑茶平均紅外二階導(dǎo)數(shù)譜的相似度均大于90.0％。對不同產(chǎn)地黑茶的36份平均紅外光譜在1800 cm-1～700 cm-1波段的吸光度值數(shù)據(jù)進(jìn)行了聚類分析，結(jié)果表明，當(dāng)臨界值為7時，各產(chǎn)地的黑茶樣品可聚為6大類。根據(jù)紅外二階導(dǎo)數(shù)譜的相似