鶴慶產(chǎn)瑪咖化學(xué)成分研究及不同產(chǎn)地瑪咖的HPLC指紋圖譜建立.pdf

1、背景：瑪咖（Lepidium meyenii Walp., Maca)為十字花科（Brassicaceae)獨(dú)行菜屬（Lepidium)一年生或兩年生草本植物，原產(chǎn)于秘魯4000a4500 m的安第斯山區(qū)，長期以來被當(dāng)?shù)赝林水?dāng)作蔬菜和保健藥物食用，素有‘秘魯人參’的美譽(yù)。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，瑪咖具有改善性功能、提高生育能力、增強(qiáng)免疫力、抗疲勞、預(yù)防骨質(zhì)疏松、改善更年期綜合癥等多種功效，因此得到各國消費(fèi)者的青睞。由于受限于原產(chǎn)地土地資源

2、和種植技術(shù)的影響，瑪咖的產(chǎn)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)無法滿足消費(fèi)者的消費(fèi)需求，聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO)建議世界各國推廣對瑪咖的種植，將瑪咖作為重要營養(yǎng)食品進(jìn)行推廣，我國自20世紀(jì)90年代開始在云南、新疆、西藏、吉林等地進(jìn)行引種，以期開發(fā)出功能更全面的保健產(chǎn)品。目前，關(guān)于瑪咖的化學(xué)成分和生物活性研究已有報道，成分研究表明瑪咖主要有生物堿、芥子油苷、異硫氰酸酯、瑪咖酰胺、瑪咖烯、甾醇等次生代謝產(chǎn)物，生物活性研究大多以其粗提取物的形式為主，但對瑪咖中某單一組份所

3、對應(yīng)的生物活性尚缺乏系統(tǒng)研究。為了更好地研究瑪咖藥理作用的機(jī)理，為了進(jìn)一步闡明其有效成分，加強(qiáng)瑪咖藥材資源的開發(fā)利用與質(zhì)量控制，本文對鶴慶產(chǎn)瑪咖乙醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究，并利用高效液相色譜（HPLC)對16批不同產(chǎn)地、色型的瑪咖進(jìn)行HPLC特征指紋圖譜研究。
　　目的：通過對鶴慶產(chǎn)瑪咖乙醇提取物的化學(xué)成分展開系統(tǒng)的研究，進(jìn)一步明確其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，尋找新的活性成分資源，深入開展對瑪咖的專屬性對照物質(zhì)的研究。同時利用HPLC技

4、術(shù)對國內(nèi)不同產(chǎn)地、色型的瑪咖進(jìn)行指紋圖譜研究，為瑪咖的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制提供可行的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：⑴采用MCI大孔吸附樹脂、正相硅膠色譜、反相硅膠色譜、SephadexLH-20色譜、半制備HPLC柱色譜以及重結(jié)晶等方法，對鶴慶產(chǎn)瑪咖的石油醚萃取部位和正丁醇萃取部位進(jìn)行分離純化，并根據(jù)理化性質(zhì)、光譜數(shù)據(jù)分析（UV、IR、1D,2D-NMR、MS)、高效液相色譜法等方法，分別鑒定所純化的單體化合物。⑵對收集自全國各地的16批次瑪咖進(jìn)

5、行HPLC指紋圖譜研究，優(yōu)化了色譜條件為：Shimadzu LC-20AD型高效液相色譜儀，紫外檢測器，Inertsil C18柱（5μm，4.6×150 mm），流動相A：0.5％磷酸水溶液，流動相B：乙腈，采用二元梯度洗脫程序；流速：1.0 mL?min-1；檢測波長220 nm；柱溫30℃；進(jìn)樣量10μL。
　　結(jié)果：①共分離得到18個化合物，分別鑒定為：macaolidine(1)，色氨酸(2)，胡蘿卜苷(3)，(3S)-

6、1,2,3,4-四氫-β-卡波林-3-羧酸(4)，綠原酸(5)，木犀草素(6)，金絲桃苷(7)，芹菜素(8)，棕櫚酸(9)，琥珀酸(10)，β-谷甾醇(11)，N-芐基十七碳酰胺(12)，N-(3-甲氧基-芐基)-十六碳酰胺(13)，十六烷酸環(huán)氧乙烷基甲酯(14)，苯甲胺(15)，monasfluore B(16)，macaridine(17)，對二甲氨基苯甲酸(18)。②16批次瑪咖藥材共標(biāo)定了13個共有指紋特征峰，對特征指紋圖譜進(jìn)行

7、相似度計算和聚類分析，結(jié)果顯示16批樣品的相似度均在0.9以上，最高相似度達(dá)到0.998。其方法學(xué)考察結(jié)果和指紋圖譜評價結(jié)果，均符合國家中藥指紋圖譜的標(biāo)準(zhǔn)，說明本試驗(yàn)建立的瑪咖藥材HPLC指紋圖譜共有模式能比較真實(shí)全面的反映反應(yīng)瑪咖的特征。
　　結(jié)論：⑴在天然產(chǎn)物中分離得到的酰胺類生物堿，化合物4、14、16為從瑪咖中分離得到的化合物。⑵通過單因素考察對瑪咖藥材的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，確定了最佳色譜條件，構(gòu)建了16批瑪咖藥材的HPLC