產(chǎn)纖維素酶微生物在農(nóng)業(yè)秸稈資源化中的應(yīng)用.pdf

1、現(xiàn)階段我國秸稈產(chǎn)量十分龐大，但暫無有效的方法處理秸稈，為了提高秸稈利用率，同時(shí)降低由于秸稈的焚燒及其他不當(dāng)處理方式引起的環(huán)境污染問題。實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展及解決秸稈資源化利用的問題迫在眉睫。
　　本次實(shí)驗(yàn)，首先選取本校生命科學(xué)與工程學(xué)院實(shí)驗(yàn)室通過基因工程獲取的三株里氏木霉工程菌，針對(duì)3株微生物的產(chǎn)纖維素酶活性進(jìn)行了篩選，通過測定3株實(shí)驗(yàn)室獲取的里氏木霉工程菌的酶活性，從而判斷3株微生物的產(chǎn)酶量及生長情況，最終得出結(jié)論:其中編號(hào)為2-

2、5的里氏木霉工程菌酶活性較低;編號(hào)為10-7的里氏木霉工程菌，表現(xiàn)出酶活性變化幅度大，不穩(wěn)定;編號(hào)為8-5的里氏木霉工程菌在實(shí)驗(yàn)過程中酶活性較高，且穩(wěn)定，比較適宜于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。同時(shí)根據(jù)產(chǎn)糖率的測定，得出編號(hào)8-5的里氏木霉工程菌有著較高的秸稈降解率，進(jìn)一步驗(yàn)證了上一步實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，最終確定編號(hào)8-5的里氏木霉工程菌可進(jìn)一步運(yùn)用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
　　其次，對(duì)編號(hào)8-5的里氏木霉工程菌降解秸稈產(chǎn)物進(jìn)行了研究，得出秸稈經(jīng)過里氏木霉工程菌降解后

3、產(chǎn)生物質(zhì)為不含淀粉的多糖類物質(zhì)。且根據(jù)氣相色譜實(shí)驗(yàn)可知，該多糖是由鼠李糖(C6H12O5)、阿拉伯糖(C5H10O5)、木糖(C5H10O5)、甘露糖(C6H12O6)、半乳糖(C6H12O6)等單糖組成。多糖的活性與其組成有很大關(guān)系，且研究多糖的組成是后續(xù)研究該種多糖活性的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，因此本次實(shí)驗(yàn)為今后秸稈降解產(chǎn)生的多糖性質(zhì)研究打下了基礎(chǔ)，有利于秸桿資源的進(jìn)一步開發(fā)利用。
　　最后，本次實(shí)驗(yàn)對(duì)里氏木霉工程菌降解秸稈條件進(jìn)行了優(yōu)化，

4、通過單因素實(shí)驗(yàn)法，得出在秸稈添加量為4％、起始pH值5.5、培養(yǎng)溫度30℃、轉(zhuǎn)速200 r/min、接種濃度107個(gè)/mL、發(fā)酵時(shí)間第5天、裝液量為75 mL時(shí)，編號(hào)為8-5的里氏木霉工程菌可達(dá)到最大酶活性。但是單因素法往往不能準(zhǔn)確預(yù)測各個(gè)因素之間的交互作用，故本次實(shí)驗(yàn)后續(xù)利用Plackett-Burman(P-B)方法篩選影響產(chǎn)酶的重要因素，得出對(duì)里氏木霉產(chǎn)纖維素酶影響的顯著性排列為:培養(yǎng)溫度＞培養(yǎng)時(shí)間＞裝液量＞接種濃度＞秸稈添加量＞