產纖維素酶微生物在農業(yè)秸稈資源化中的應用.pdf

1、現(xiàn)階段我國秸稈產量十分龐大，但暫無有效的方法處理秸稈，為了提高秸稈利用率，同時降低由于秸稈的焚燒及其他不當處理方式引起的環(huán)境污染問題。實現(xiàn)農業(yè)可持續(xù)發(fā)展及解決秸稈資源化利用的問題迫在眉睫。
　　本次實驗，首先選取本校生命科學與工程學院實驗室通過基因工程獲取的三株里氏木霉工程菌，針對3株微生物的產纖維素酶活性進行了篩選，通過測定3株實驗室獲取的里氏木霉工程菌的酶活性，從而判斷3株微生物的產酶量及生長情況，最終得出結論:其中編號為2-

2、5的里氏木霉工程菌酶活性較低;編號為10-7的里氏木霉工程菌，表現(xiàn)出酶活性變化幅度大，不穩(wěn)定;編號為8-5的里氏木霉工程菌在實驗過程中酶活性較高，且穩(wěn)定，比較適宜于后續(xù)實驗。同時根據(jù)產糖率的測定，得出編號8-5的里氏木霉工程菌有著較高的秸稈降解率，進一步驗證了上一步實驗的準確性，最終確定編號8-5的里氏木霉工程菌可進一步運用于后續(xù)實驗。
　　其次，對編號8-5的里氏木霉工程菌降解秸稈產物進行了研究，得出秸稈經(jīng)過里氏木霉工程菌降解后

3、產生物質為不含淀粉的多糖類物質。且根據(jù)氣相色譜實驗可知，該多糖是由鼠李糖(C6H12O5)、阿拉伯糖(C5H10O5)、木糖(C5H10O5)、甘露糖(C6H12O6)、半乳糖(C6H12O6)等單糖組成。多糖的活性與其組成有很大關系，且研究多糖的組成是后續(xù)研究該種多糖活性的基礎實驗，因此本次實驗為今后秸稈降解產生的多糖性質研究打下了基礎，有利于秸桿資源的進一步開發(fā)利用。
　　最后，本次實驗對里氏木霉工程菌降解秸稈條件進行了優(yōu)化，

4、通過單因素實驗法，得出在秸稈添加量為4％、起始pH值5.5、培養(yǎng)溫度30℃、轉速200 r/min、接種濃度107個/mL、發(fā)酵時間第5天、裝液量為75 mL時，編號為8-5的里氏木霉工程菌可達到最大酶活性。但是單因素法往往不能準確預測各個因素之間的交互作用，故本次實驗后續(xù)利用Plackett-Burman(P-B)方法篩選影響產酶的重要因素，得出對里氏木霉產纖維素酶影響的顯著性排列為:培養(yǎng)溫度＞培養(yǎng)時間＞裝液量＞接種濃度＞秸稈添加量＞