水產(chǎn)品中農(nóng)、獸藥殘留檢測(cè)樣品前處理技術(shù)研究.pdf

1、本論文主要分為三部分:
　　第一部分,水產(chǎn)品農(nóng)、獸藥殘留檢測(cè)樣品前處理技術(shù)研究進(jìn)展。簡單介紹了水產(chǎn)品的污染現(xiàn)狀及其對(duì)人類健康帶來的威脅;概述了水產(chǎn)品中農(nóng)、獸藥殘檢測(cè)常用的樣品前處理方法及影響因素;綜述了影響水產(chǎn)品藥殘?zhí)崛〉闹饕蛩氐鞍踪|(zhì)和藥物小分子之間結(jié)合作用的研究手段及研究意義。
　　第二部分,水產(chǎn)品中氟喹諾酮類(FQs)藥物殘留檢測(cè)樣品前處理技術(shù)研究。研究了FQs藥物與蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)與乙腈之間的相互作用,從理論上闡明了蛋

2、白質(zhì)以及乙腈濃度對(duì)水產(chǎn)品中FQs藥物殘留提取的影響,并據(jù)此在QuEChERS方法的基礎(chǔ)上發(fā)展了新的樣品前處理技術(shù)。
　　1,以魚血清蛋白(FSA)為例,利用熒光光譜法研究了4種FQs藥物依諾沙星(EO)、諾氟沙星(NRF)、鹽酸環(huán)丙沙星(CPF HCl)、恩諾沙星(ERF)與蛋白質(zhì)之間的結(jié)合作用力,結(jié)果表明4種FQs藥物和蛋白質(zhì)均是通過氫鍵相互作用。
　　2,通過研究FQs在不同有機(jī)溶劑中的溶解度及分配系數(shù),決定以乙腈作為主

3、要提取劑;同步熒光以及瑞利共振散射實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),50％(v/v)至100%(v/v)的乙腈水溶液不僅可以不同程度的破壞蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的氫鍵,使蛋白質(zhì)發(fā)生變性,也能破壞蛋白質(zhì)與藥物之間的氫鍵,使藥物游離出來;實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明90%的乙腈酸溶液可使蛋白質(zhì)變性沉淀完全,同時(shí)藥物也能最大程度的釋放出來。
　　3,在QuEChERS方法的基礎(chǔ)上,通過篩選不同的提取劑以及凈化劑,開發(fā)了一種新的樣品前處理技術(shù),即以90%乙腈酸溶液為提取劑,結(jié)合分散固相

4、萃取法來提取凈化水產(chǎn)品中FQs藥物殘留,最后利用高效液相色譜(HPLC)進(jìn)行分析測(cè)定;該方法操作簡便、快速,可以將提取、基質(zhì)去除與凈化一次完成,不僅對(duì)水產(chǎn)品中的蛋白質(zhì)基質(zhì)有很好的凈化效果,而且能得到較高的提取回收率。經(jīng)過實(shí)際樣品檢測(cè),添加濃度為50?200 ug·kg-1時(shí),4種FQs藥物回收率可達(dá)73.3?95.9%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10.7%,并且明顯優(yōu)于國標(biāo)法,完全能夠滿足水產(chǎn)品中FQs藥物殘留的即時(shí)高效檢測(cè)。
　　第三部

5、分,水產(chǎn)品中有機(jī)氯類農(nóng)藥(OCPs)殘留檢測(cè)樣品前處理技術(shù)研究。研究了OCPs與蛋白質(zhì)之間的相互作用,從理論上闡明了蛋白質(zhì)對(duì)水產(chǎn)品中OCPs殘留提取的影響,建立了水產(chǎn)品中OCPs殘留檢測(cè)的新方法。
　　1,以牛血清蛋白(BSA)為例,利用熒光光譜法研究了五種OCPsδ-BHC、氯丹、艾氏劑、o,p'-DDT、HCB和蛋白質(zhì)之間的結(jié)合作用力,結(jié)果表明五種OCPs均是通過疏水作用力與蛋白質(zhì)相互作用,且兩者之間的結(jié)合隨著溫度的升高而增強(qiáng)

6、。
　　2,通過對(duì)比QuEChERS、液液萃取等前處理技術(shù),最終選擇將對(duì)OCPs萃取率較高的雙水相體系,即親水性有機(jī)溶劑、無機(jī)鹽、水組成的雙水相系統(tǒng)應(yīng)用到水產(chǎn)品中OCPs殘留檢測(cè)的樣品前處理當(dāng)中;并以乙腈-硫酸銨-水體系為例,利用濁點(diǎn)法、稱重法和離子色譜法測(cè)定了其雙水相的形成條件以及液液相平衡組成,為選擇合適的乙腈、無機(jī)鹽、水的組成比例提供了依據(jù)。
　　3,通過對(duì)比各種無機(jī)鹽-乙腈-水體系對(duì)OCPs的萃取回收率,選取了最佳雙

7、水相體系及操作條件。最終建立了以乙腈-醋酸鉀-水或者乙腈-硫酸銨-水體系為提取劑、以PSA顆粒為吸附劑、無水硫酸鎂為除水劑、經(jīng)離心分離去基質(zhì)后氣相色譜直接進(jìn)樣分析的方法,測(cè)定了水產(chǎn)品樣品中的14種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留。該方法操作簡便、快速,可以將提取、基質(zhì)去除與凈化一次完成,不僅有很好的凈化效果,而且提取回收率較高,明顯優(yōu)于國標(biāo)法。雙水相萃取結(jié)合分散固相萃取凈化法作為一種全新的樣品前處理技術(shù),完全能夠滿足水產(chǎn)品中OCPs藥物殘留的簡便、快速、