水產(chǎn)品中替米考星殘留檢測方法的研究.pdf

1、替米考星(Tilmicosin,TIL)是一種半合成大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,對所有的革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌、霉形體、螺旋體等均有抑制作用,尤其是對多種支原體及螺旋體有很強的抑制作用,在水產(chǎn)養(yǎng)殖中用于預(yù)防和治療相關(guān)疾病。然而隨著該藥在食物鏈中的富集,長期食用會改變?nèi)祟惸c道菌群的微生態(tài)環(huán)境,造成人體腸道細菌菌群失調(diào)。因此,歐盟和日本等國家對其在水產(chǎn)品中的最高限量都做出了明確規(guī)定。
　　 本文以替米考星為檢測目標(biāo)物,參照國內(nèi)外研究現(xiàn)

2、狀,對水產(chǎn)品中替米考星殘留量的測定方法進行探討研究,主要研究內(nèi)容有:
　　 1)建立一種適合替米考星殘留檢測的高效液相色譜(HPLC)法。通過對波長、柱溫、流速、流動相等因素的優(yōu)化,確定了最佳色譜分離條件。并從提取和凈化兩個方面對前處理條件進行選擇,確定了最適條件。實驗結(jié)果表明,該方法線性范圍較寬,精密度高,可靠性好,方法定量限為20μg/kg。
　　 2)建立水產(chǎn)品中替米考星殘留檢測的高效液相色譜.質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-

3、MS/MS)法。采用電噴霧離子源,正離子掃描方式,選擇反應(yīng)監(jiān)測模式。定量限為5μ/kg。在5μg/kg、50μg/kg和100μg/kg3個添加水平下,試樣的加標(biāo)回收率為86.93％-103.41％,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10％。
　　 3)對以上兩種方法分別進行不確定度評定。分析了測量方法的質(zhì)量、測量結(jié)果的離散程度,并找到主要的不確定度來源。據(jù)評定結(jié)果,用高效液相色譜法測定水產(chǎn)品中替米考星殘留量的不確定度主要來自目標(biāo)物回收和峰面積測

4、量2個方面,而用液相色譜.質(zhì)譜聯(lián)用法的不確定度主要來源于目標(biāo)物的回收。評定結(jié)果為進一步完善測量程序提供了理論依據(jù)。
　　 4)在單一目標(biāo)物測定研究的基礎(chǔ)上,將建立的HPLC-MS/MS法推廣到同時檢出水產(chǎn)品中的4種大環(huán)內(nèi)酯類藥物的分析。預(yù)實驗表明了該方法簡單、可行,適用范圍廣。
　　 5)將研究制定的分析方法編寫成《水產(chǎn)品中替米考星殘留量的測定》的標(biāo)準(zhǔn)文本,供本方法進一步制定國家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或地方標(biāo)準(zhǔn)時應(yīng)用。