基于SSR技術(shù)構(gòu)建黑龍江省粳米DNA指紋數(shù)據(jù)庫的研究.pdf

1、黑龍江粳米品質(zhì)優(yōu)良，商業(yè)價(jià)值巨大，但市售粳米摻假現(xiàn)象嚴(yán)重。本實(shí)驗(yàn)基于SSR分子標(biāo)記技術(shù)，以61份黑龍江省主栽的粳米為材料，篩選出19對核心SSR引物，構(gòu)建受試大米樣品的DNA指紋圖譜，并研究和探討這些寒地粳米品種的遺傳差異。以期從分子水平上對各種粳稻品種進(jìn)行準(zhǔn)確有效的鑒定，初步解決目前稻米市場摻假嚴(yán)重的現(xiàn)象，同時(shí)也為黑龍江省寒地粳稻品種資源遺傳多樣性的保護(hù)和及優(yōu)良水稻品種的培育提供理論依據(jù)。通過研究獲得的如下結(jié)果：
　　1.大米總

2、DNA提取方法的優(yōu)化。本實(shí)驗(yàn)在改進(jìn)CTAB法的基礎(chǔ)上優(yōu)化了提取條件，結(jié)果表明經(jīng)過改進(jìn)后的DNA提取濃度和質(zhì)量可以滿足SSR實(shí)驗(yàn)的要求。
　　2.SSR實(shí)驗(yàn)體系優(yōu)化。本實(shí)驗(yàn)對SSR技術(shù)體系進(jìn)行了優(yōu)化，包括SSR-PCR體系、聚丙烯酰氨凝膠電泳體系以及銀染顯色體系優(yōu)化。優(yōu)化后的條件可以得到比較理想實(shí)驗(yàn)結(jié)果，有利于下一步進(jìn)行SSR帶型信息的統(tǒng)計(jì)和分析。
　　3.核心SSR引物的篩選與DNA指紋圖譜的構(gòu)建。利用優(yōu)化后的實(shí)驗(yàn)條件通過S

3、SR實(shí)驗(yàn)篩選出19對擴(kuò)增效果好、帶型清晰并且多態(tài)性較好的核心SSR引物，并構(gòu)建本實(shí)驗(yàn)的61份供試大米的DNA指紋數(shù)據(jù)庫。
　　4.利用得到的DNA指紋圖譜信息對SSR引物進(jìn)行多態(tài)性分析，結(jié)果表明：這19對核心SSR引物在61份粳米材料中擴(kuò)增出71個(gè)等位基因?；赟SR標(biāo)記的聚類分析結(jié)果表明：61份供試粳米可分為2大類，其中第一大類包含51份材料，這一大類又分成若干小類，可以區(qū)分所有材料親緣關(guān)系。遺傳多樣性分析，結(jié)果表明核心SSR引