葡萄DNA指紋數(shù)據(jù)庫的構(gòu)建及品種鑒定.pdf

1、葡萄是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物之一，優(yōu)良品種的選育對改善葡萄品質(zhì)和提高種植效益起著至關(guān)重要的作用。然而隨著新品種選育技術(shù)的同質(zhì)化，使得葡萄品種之間的遺傳差異越來越小，完全依據(jù)形態(tài)特征區(qū)分植株顯得越來越困難。近年來，隨著生物技術(shù)的發(fā)展，應(yīng)用 DNA分子標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建 DNA指紋數(shù)據(jù)庫成為葡萄品種鑒定的一項關(guān)鍵技術(shù)。該技術(shù)作為植物 DUS（Distinctness，Uniformity， Stability）測試的一種輔助工具，可以提高近似品種篩選

2、的效率和準(zhǔn)確性，進(jìn)而加快測試進(jìn)程。本文以SSR分子標(biāo)記為技術(shù)手段，以我國296個葡萄品種為試材，利用篩選出的一套多態(tài)性較高的SSR核心引物對其進(jìn)行了DNA指紋數(shù)據(jù)庫的構(gòu)建，為葡萄品種鑒定及親緣關(guān)系分析提供了科學(xué)依據(jù)。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴以24份遺傳差異較大的葡萄品種為試材，從140對 SSR引物中篩選出38對多態(tài)性高、穩(wěn)定性好、帶型清晰的SSR引物，其中包括國際通用的9對SSR引物，并利用該9對引物進(jìn)行葡萄 DNA指紋數(shù)據(jù)

3、庫的構(gòu)建、品種鑒定及遺傳多樣性分析。⑵所利用的9對SSR引物在296個葡萄品種中共檢測到208個等位位點，其中多態(tài)性位點為208個，多態(tài)性比率為100％。每個SSR位點檢測出的等位位點變幅為17-32個，平均值為23.11，擴(kuò)增產(chǎn)物片段大小的變幅為121-289 bp，每個位點的基因型個數(shù)變幅為64-116，多態(tài)性信息含量變幅為0.77-0.88，平均值為0.83。⑶UPGMA聚類分析表明，243份二倍體供試材料可被分為真葡萄亞屬和圓葉

4、葡萄亞屬兩大類，而真葡萄亞屬又被分為8個野生種類群和2個栽培種類群。53份四倍體供試材料被分為3組，聚類結(jié)果與供試材料已知的系譜來源基本吻合。⑷用9對SSR引物對61份中國地方品種進(jìn)行鑒定分析，發(fā)現(xiàn)其中存在3組同名異物品種和9組疑似同物異名品種，例如，紅葡萄-新疆與紅葡萄、綠木納格與木納格、伊犁葡萄與和田紅、黑葡萄-新疆與紫紅型葡萄等。⑸利用篩選的9對SSR核心引物初步構(gòu)建了296個葡萄品種的DNA指紋數(shù)據(jù)庫。由指紋數(shù)據(jù)庫可知，利用其中