表面電荷對納微球佐劑效果的影響之細胞水平研究.pdf

1、目前疫苗佐劑的發(fā)展包括優(yōu)化抗原至抗原提呈細胞(APCs)（如巨噬細胞）的遞呈途徑。納微球作為佐劑成為近年來疫苗遞呈系統(tǒng)研究的一大熱點。本課題采用乙肝表面抗原為模型抗原，首次探討了巨噬細胞對粒徑均一的不同表面電荷聚乳酸(PLA)納微球的攝取行為以及活化情況。
　　 首先利用快速膜乳化技術(shù)，制備得到了PLA納微球，納微球粒徑均一性好、表面光滑、球形完整，其平均粒徑為900 nm，其多分散性指數(shù)為0.029。
　　 然后將一定

2、量PLA納微球分別添加到1％(w/v)的殼聚糖(CS)、殼聚糖鹽酸鹽(CSC)以及聚乙烯亞胺(PEI)溶液中，利用靜電作用直接對微球鍍層，使納微球的表面帶有正電荷。SEM和粒徑分布結(jié)果表明修飾后對PLA納微球形貌、粒徑分布和分散性沒有影響，但是PLA、PLA-CS、PLA-CSC、PLA-PEI的表面電荷依次增高。其中PLA的平均電位為-21.3 mV，PLA-CS的平均電位為7.5 mV，PLA-CSC的平均電位為13.1 mV，PL

3、A-PEI的平均電位為31.7 mV。
　　 表面電荷的增加，顯著的提高了PLA微球?qū)BsAg的吸附效率?？瞻譖LA微球?qū)BsAg的吸附率僅為3.89％，采用殼聚糖和殼聚糖鹽酸鹽修飾的PLA微球，對HBsAg吸附率分別為23.97％和58.68％，而聚乙烯亞胺修飾的PLA微球?qū)BsAg的吸附效率可高達62.63％。
　　 最后，采用三種巨噬細胞考察表面電荷對納微球作為佐劑的效果影響。小鼠腹腔巨噬細胞的考察結(jié)果表明表