蓮子分離蛋白對小鼠抗衰老作用的研究.pdf

1、本文以蓮子作為原料，通過優(yōu)化蛋白質(zhì)的提取條件，采用DEAE-cellulose52純化得到分離蛋白，評價其營養(yǎng)價值，并通過D-半乳糖致衰老小鼠實驗進(jìn)一步研究分離蛋白的抗衰老作用，結(jié)果如下:
　　1.采用Tris-HCl緩沖液浸提蓮子中的總蛋白，并利用響應(yīng)面法優(yōu)化其提取條件，得到的最佳提取工藝為:液料比7.2∶1，提取時間2.4h，提取溫度11.1℃，此時總蛋白的提取率達(dá)到81.35％，與回歸模型的相對誤差小于0.5％。
　　

2、2.經(jīng)透析除鹽后的蓮子蛋白再結(jié)合DEAE-cellulose52純化，即用最佳工藝提取的蛋白液上樣，用不同濃度(0.2、0.4、0.6、0.8mol/L)的Tris-NaCl洗脫液梯度洗脫，得到的分離蛋白蛋白濃度為83.75％。氨基酸分析后得出分離蛋白中氨基酸種類是16種，必需氨基酸的比例為57％，分離蛋白的氨基酸評分為48.2，化學(xué)評分為38.4，接近于WHO/FAO的氨基酸模式，生物價約為47，營養(yǎng)價值較全面。
　　3.建立D

3、-半乳糖致衰老的動物模型，分為正常組、模型組、高劑量組、低劑量組以及陽性對照組，通過測定血液以及肝臟、心臟、腎臟中的抗氧化指標(biāo)(包括丙二醛(MDA)、過氧化氫酶(CAT)、總超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的酶活力）以及皮膚中的羥脯氨酸的含量來研究蓮子分離蛋白的抗衰老活性，結(jié)果顯示，高劑量的蓮子分離蛋白(500mg/kg/d)能明顯降低血液與內(nèi)臟組織中的MDA含量，能顯著提高CAT、GSH-Px、SOD的活力

4、以及皮膚中的羥脯氨酸含量(P＜0.05)，而低劑量(100mg/kg/d)的作用不顯著(P＞0.05)，但與模型組相比還是有一定的作用，陽性對照組(300mg/kg/d)的作用幾乎介于兩者之間，符合理論的劑量關(guān)系，且蓮子分離蛋白對于抗氧化酶的作用力大小為:CAT＞SOD＞GSH-Px。并通過石蠟切片后的細(xì)胞觀察，得出模型組中細(xì)胞核內(nèi)含物明顯增多、染色深，高劑量組與陽性對照組均能明顯改善此現(xiàn)象，但低劑量組改善作用不顯著，進(jìn)一步證實了前面所