白藜蘆醇對大鼠的抗衰老作用研究.pdf

1、在有機體的衰老過程中，免疫功能出現(xiàn)下降的趨勢，特異性和非特異性免疫應答均出現(xiàn)相應的變化。免疫老化是一個相當復雜的過程，已有研究表明人類壽命與機體的免疫功能密切相關，免疫系統(tǒng)是機體保護自己免受其他物質(zhì)損害的對體內(nèi)外環(huán)境的適應和反應體系。同時，免疫系統(tǒng)在細胞和分子水平上與細胞分化發(fā)育、腫瘤、自身免疫性疾病等過程密切相關，從根本上參與了機體老化的整個過程。白藜蘆醇（Resveratrol, RSV）屬于非黃酮類多酚化合物，是許多種子植物包括葡

2、萄和漿果在遇到不利環(huán)境中所產(chǎn)生的一種天然的植物抗毒素，實驗證據(jù)表明白藜蘆醇具有抗衰老、抗腫瘤、抗炎癥和免疫調(diào)節(jié)的作用，可以提高老齡小鼠和人的免疫功能。
　　盡管白藜蘆醇長久以來因其促進健康，抵抗衰老和增強免疫的特性而受到高度評價，但是其調(diào)節(jié)免疫功能還缺乏系統(tǒng)的科學證據(jù)，其增強免疫功能的內(nèi)在機制不甚明確。本研究擬在于探索白藜蘆醇的口服吸收對年輕大鼠、中年大鼠和老年大鼠獲得性免疫及谷氨酰半胱氨酸連接酶的影響，為白藜蘆醇在免疫調(diào)節(jié)和抗衰

3、老領域的應用建立數(shù)據(jù)基礎。
　　在本研究中，我們使用全自動生化分析儀和血液分析儀測定白藜蘆醇對大鼠血液學/生物化學指標的影響，探討生理條件下白藜蘆醇是否影響大鼠的血液學和生物化學指標，結果顯示白藜蘆醇的口服吸收對大鼠體重及紅細胞、白細胞、血小板、血紅蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等血液學指標未造成明顯變化。
　　因遲發(fā)型免疫應答（DTH）會隨著年齡的增加而減弱，弱DTH反應或沒有DTH反應常常與疾病

4、的發(fā)病率和死亡率的升高相關聯(lián)，我們采用免疫注射的方法，探討白藜蘆醇對不同年齡段大鼠的DTH應答的影響，結果顯示白藜蘆醇能夠顯著增強老齡大鼠的DTH反應。
　　老齡個體體液免疫應答下降的主要表現(xiàn)是針對許多疫苗的免疫應答、抗體滴度的產(chǎn)生以及抗原抗體親和力的持續(xù)下降，為探討白藜蘆醇對抗體產(chǎn)生的影響，我們采用免疫注射KLH后ELISA法檢測大鼠血清不同時間點抗KLH特異性IgG、IgG1和IgG2a抗體的變化，探討其對體液免疫應答的影響，

5、結果顯示白藜蘆醇顯著增強老齡大鼠的抗KLH特異性IgG、IgG1和IgG2a抗體的產(chǎn)生，明顯提高了老齡大鼠對抗原的反應性，增強了體液免疫應答反應。
　　在衰老過程中，T淋巴細胞的總數(shù)量和各亞群所占的比例發(fā)生顯著的變化，通過對大鼠脾臟中T細胞和B細胞組成進行分析，探討白藜蘆醇可能對細胞免疫功能產(chǎn)生的影響；檢測口服白藜蘆醇后大鼠脾細胞對T細胞有絲分裂原ConA、B細胞有絲分裂原LPS和特異性抗原KLH刺激后的增殖情況，探討其對細胞增殖

6、可能的影響；結果顯示白藜蘆醇比較明顯的提高老齡大鼠CD4+T細胞的數(shù)量，提示白藜蘆醇對老齡大鼠的細胞免疫應答可能起到調(diào)節(jié)的作用。
　　谷胱甘肽（GSH）在保持細胞的氧化還原狀態(tài)中發(fā)揮十分重要的作用，GSH的水平隨著衰老發(fā)生的變化是衰老研究中的熱點問題，谷氨酰-L-半胱氨酸連接酶( glutamyl-L-cysteineligase,GCL)，以前被稱為γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetas

7、e,γ-GCS)，是GSH從頭合成過程中催化酶促反應第一步反應的催化酶，也是谷胱甘肽從頭合成過程中的限速酶，我們通過熒光定量PCR、Western Blot和酶活分析等方法研究大鼠心臟、腦和肝臟中GSH代謝過程中的關鍵酶谷氨酰半胱氨酸連接酶（GCL）催化亞基（GCLC）和調(diào)節(jié)亞基(GCLM）在不同年齡段中的變化及白藜蘆醇對老齡大鼠各組織中GCL基因表達、蛋白含量和酶活性的的影響，結果顯示在肝臟、心臟和腦組織中谷氨酰半胱氨酸連接酶催化亞基

8、和調(diào)節(jié)亞基的基因表達和蛋白含量隨著年齡增長，在中年組達到較高的水平，至老年組出現(xiàn)明顯的下降，白藜蘆醇能夠顯著提高老齡大鼠肝臟、心臟、腦中谷氨酰半胱氨酸連接酶催化亞基和調(diào)節(jié)亞基的基因表達、蛋白含量和酶活性水平。
　　綜合以上實驗結果，我們認為適量的白藜蘆醇口服吸收在不影響血液學指標和體重的情況下，在老齡Wistar大鼠中通過增強體液免疫應答和細胞免疫應答能夠起到的免疫調(diào)節(jié)和保護作用；通過調(diào)節(jié)老齡大鼠中谷氨酰半胱氨酸連接酶的含量和酶活