苯脲類除草劑伏草隆免疫檢測方法的研究.pdf

1、伏草隆為內(nèi)吸選擇性土壤處理使用除草劑，屬于苯脲類除草劑，這類農(nóng)藥可由地表徑流，進(jìn)入地下水和土壤，容易造成地下水和土壤污染。本實驗成功的合成了伏草隆半被原、人工免疫原、酶標(biāo)抗原、包被抗原，并利用伏草隆人工免疫原制備了具有的高特異性的苯脲類除草劑伏草隆的多克隆抗體。本實驗對伏草隆的免疫分析方法進(jìn)行了深入系統(tǒng)的研究，利用得到的多克隆抗體建立了兩種簡便、快速、實用的伏草隆免疫分析方法—直接競爭酶聯(lián)免疫檢測方法(ELISA)和免疫層析試紙條方法(

2、GICA)。
　　ELISA方法的靈敏度(IC50)為0.58±0.011μg/L，最低檢出限(IC15)為0.08±0.021μg/L。除了與草不隆的交叉反應(yīng)率為69.4％以外，與其他苯脲類除草劑交叉反應(yīng)均較小。實驗中選擇了海河水、井水、自來水和土壤作為檢測樣品，通過優(yōu)化條件消除基質(zhì)影響，確定了樣品的前處理方法，對樣品進(jìn)行了添加回收實驗，ELISA方法的回收率在70～120％之間，變異系數(shù)在3.68～17.90％之間。此外，本實

3、驗采用高效液相方法對ELISA方法進(jìn)行了驗證，其相關(guān)性方程為y=1.124x+0.056，相關(guān)系數(shù)r2為0.986，充分說明了建立的伏草隆直接競爭ELISA檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性。
　　免疫層析試紙條的方法檢出限20μg/L，選取海河水、自來水、井水陰性水樣作為檢測樣品，分別添加5、10、20μg/L的伏草隆標(biāo)準(zhǔn)品，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾后直接上樣，經(jīng)免疫層析試紙條和ELISA檢測，結(jié)果一致性良好，驗證了免疫層析試紙條方法的