基于PtTFPP磷光氧氣納米傳感器對PDT誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞損傷的研究.pdf

1、光動力治療作為一種新興的治療腫瘤的方法，因其特異性好、毒副作用小和操作簡單等優(yōu)點受到越來越多的關(guān)注。就體外光動力實驗而言，通常是利用MTT檢測法對其毒性進(jìn)行評估。本文利用一種可以檢測細(xì)胞內(nèi)氧含量變化的磷光氧氣納米傳感器對光動力誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷進(jìn)行評估。基于這種方法，獲得與MTT檢測法相一致的測試結(jié)果，并且成功檢測到光動力治療對細(xì)胞線粒體的直接損傷，這是MTT法所不具備的。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴利用MTT檢測手段，從原卟啉鈉濃度

2、和光照劑量兩個方面對體外光動力實驗條件進(jìn)行探索，初步掌握了不同光動力條件下HepG2細(xì)胞的死傷程度，并為后續(xù)研究提供了合適的實驗條件。⑵利用再沉淀-包覆法，分別制備了靶向細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)的兩種氧氣傳感器。這兩種氧氣傳感器都是以聚苯乙烯一有機(jī)硅氧烷為基質(zhì)，將疏水性的氧氣分子探針PtTFPP和熒光參比分子C6隨機(jī)封裝到納米顆粒內(nèi)，不同的是，用于檢測細(xì)胞內(nèi)氧含量變化的納米顆粒表層用帶正電的PLL殼層包覆，基于MTT法毒性檢測和共聚焦成像驗證了這

3、種具有核殼結(jié)構(gòu)的氧氣納米傳感器具有較低的毒性和較好的細(xì)胞攝取率。利用時間分辨熒光法檢測PDT作用后HepG2細(xì)胞的呼吸速率，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)氧氣濃度變化要快于細(xì)胞外氧氣濃度變化，其測試結(jié)果值更為精確，因此在后續(xù)研究中，利用細(xì)胞內(nèi)氧氣濃度變化來對光敏劑藥效進(jìn)行評估。接著，一系列的基于細(xì)胞呼吸檢測PDT療效的實驗證明這種測試手段與MTT法得到的結(jié)果相似，其結(jié)果的可靠性得到證實。此外，基于這種測試方法也成功檢測到了PDT對細(xì)胞線粒體的直接損傷，這是