可形成無規(guī)線團和膠束結(jié)構(gòu)的聚陽離子基因遞送性能研究.pdf

1、基因治療有望成為治療癌癥等疾病的有效方法，基因治療獲得臨床應(yīng)用的關(guān)鍵是高效遞送基因藥物的載體材料。作為非病毒基因載體的一種，聚陽離子能夠有效的避免酶解并促進(jìn)細(xì)胞攝取。雖然許多聚陽離子在很多方面表現(xiàn)出較低的免疫原性、制備簡單以及成本低等優(yōu)點，但是較低的基因轉(zhuǎn)染效率仍然是基因治療的瓶頸。為提高基因遞送效率，采取了許多種化學(xué)修飾的方法。
　　本研究我們利用PVP具有協(xié)同遞送基因藥物的性能及PDMAEMA的遞送基因藥物的優(yōu)良性能制備具有不

2、同PVP鏈長的雙親水性聚合物PVP-g-PDMAEMA。我們研究了親水鏈長度對基因遞送的影響，優(yōu)化親水端長度。在此基礎(chǔ)上制備兩親性聚合物——PVP-g-PDMAEMA-b-PMMA。探究了以PVP-g-PDMAEMA形成的無規(guī)線團結(jié)構(gòu)和PVP-g-PDMAEMA-b-PMMA形成的膠束結(jié)構(gòu)對基因遞送的影響。PVP-g-PDMAEMA-b-PMMA具有較低的CMC值，約為6.3×10-3 mg/mL。PVP-g-PDMAEMA-b-PMM

3、A/pDNA形成的納米粒粒徑與電位均比 PVP-g-PDMAEMA/pDNA明顯小。與PVP-g-PDMAEMA相比，PVP-g-PDMAEMA-b-PMMA顯示出較好的基因轉(zhuǎn)染效率，在293T細(xì)胞上以較低的N/P比約為3:1時明顯的超過PEI的轉(zhuǎn)染效率。因此，結(jié)果表明PVP-g-PDMAEMA-b-PMMA是一種高效的基因載體。
　　聚陽離子雖然體外具有較高的轉(zhuǎn)染效率，但體內(nèi)轉(zhuǎn)染效率較低。為了解決此問題，我們發(fā)展了基于BSA的電

4、荷反轉(zhuǎn)和二硫鍵可逆形成斷裂的方法。采用巰基乙胺修飾的牛血清白蛋白（SH-BSA）與PVP-g-PDMAEMA-b-PMMA/pDNA通過靜電引力結(jié)合，形成三元復(fù)合物，且SH-BSA表面的巰基氧化交聯(lián)成二硫鍵，提高其穩(wěn)定性。SH-BSA的等電點從4.7提高到5.3。在生理條件下，SH-BSA帶有負(fù)電荷；在pH為5.0時，SH-BSA帶有正電荷。SH-BSA隨著pH的變化發(fā)生電荷反轉(zhuǎn)作用，與PVP-g-PDMAEMA-b-PMMA/pDNA