鏈霉菌YM的誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、本文主要對(duì)鏈霉菌YM進(jìn)行誘變選育和發(fā)酵條件的優(yōu)化，以提高抗生素的發(fā)酵水平，為進(jìn)一步研究和工業(yè)化生產(chǎn)提供支持。首先對(duì)鏈霉菌YM進(jìn)行高產(chǎn)抗生素菌株的誘變選育。文中采用敏感菌-枯草芽孢桿菌作為指示菌，以牛津杯法檢測(cè)抗生素的效價(jià)。對(duì)鏈霉菌YM進(jìn)行菌種純化并編號(hào)為YM-1，通過紫外線誘變、瓊脂塊法初篩和搖瓶復(fù)篩得到高產(chǎn)抗生素菌株YM-2；然后對(duì)紫外線誘變得到的高產(chǎn)菌株YM-2進(jìn)行亞硝酸誘變、初篩和復(fù)篩得到高產(chǎn)菌株YM-3，其發(fā)酵上清液的抑菌圈直徑

2、達(dá)到23.6mm，與出發(fā)菌株YM-1相比，YM-3產(chǎn)抗生素的能力提高60.5％，且經(jīng)過多次傳代實(shí)驗(yàn)表明遺傳穩(wěn)定性較好。
　　 在菌株YM-3的基礎(chǔ)上，優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)條件以提高菌株YM-3的抗生素的產(chǎn)量。通過單因素實(shí)驗(yàn)分別考察碳源、氮源、無機(jī)鹽等對(duì)菌株YM-3產(chǎn)活性物質(zhì)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：葡萄糖4.0％、蛋白胨1.5％、K2HPO4 25.0×10-3％，NaCl 0.15％利于抗生素的產(chǎn)生。然后經(jīng)Plackett-Bur

3、man實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選出葡萄糖、蛋白胨、NaCl三個(gè)主要因素，最后利用中心組合實(shí)驗(yàn)確定3種組分的最佳組成為葡萄糖4.68％、蛋白胨1.25％、NaCl 0.12％。通過發(fā)酵條件的單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)的分析，得出YM-3的最佳發(fā)酵培養(yǎng)條件為：最佳接種齡為90h、接種量為12mL、搖瓶的裝液量為60mL/250mL、搖床轉(zhuǎn)速為160r/min、搖床培養(yǎng)溫度為30℃、發(fā)培養(yǎng)基的初始pH為7.2。發(fā)酵液的抑菌圈直徑達(dá)37.6mm。
　　 本