SPR生物傳感器的構建及對檸檬黃和蘇丹紅I的檢測.pdf

1、隨著我國經濟的發(fā)展和人民生活水平的不斷提高，人們對食品的安全和質量的要求越來越高。與此同時，因合成色素而引發(fā)的食品安全問題頻繁發(fā)生。大量的研究報告指出，幾乎所有的合成色素都不能向人體提供營養(yǎng)物質，某些合成色素甚至因為含有苯環(huán)、R-N=N-R鍵或氧雜蒽等結構的化合物，還會轉化成致癌物質而危害人體健康。對此，世界各國對合成色素的使用都作出嚴格規(guī)范。然而，近幾年來在世界范圍內，如蘇丹紅事件、檸檬黃饅頭等食品安全事件屢屢發(fā)生，引起了全世界的關注

2、。因此建立快捷、簡便、靈敏的檢測合成色素的方法成為了科研人員的首要工作。
　　表面等離子體共振(Surface Plasmon Resonanc，SPR)技術的問世為人們提供了一種新的研究手段。表面等離子共振檢測技術是一種無需標記、實時在線和靈敏度高的快速檢測技術，因其獨特的檢測優(yōu)勢被廣泛的應用于食品安全領域。
　　本研究采用SPR生物傳感器檢測橙色飲料中的檸檬黃含量，主要圍繞檢測中的幾項關鍵技術問題進行研究，并通過對檸檬黃

3、的檢測實驗驗證方法的可行性。同時利用SPR生物傳感器檢測蘇丹紅Ⅰ與β-環(huán)糊精的相互作用，探討了二者作用機理。
　　首先，本文介紹了色素的作用、分類和危害，并且分別詳細的介紹了檸檬黃和蘇丹紅Ⅰ。著重介紹了生物傳感器和SPR生物傳感器的發(fā)展、原理和特點。還針對SPR生物傳感器的應用和發(fā)展趨勢進行了進一步的介紹。
　　其次，針對檢測的對象檸檬黃小分子的特點，通過抗原與抗體的特異性結合，采用競爭法進行檢測。實驗過程包括:檸檬黃半抗原

4、的制備、酸度對檢測體系的影響，樣品預處理方法，干擾實驗，樣品的檢測，方法的對比等幾項研究。運用分子自組裝技術，對SPR生物傳感器芯片進行修飾，使用巰基丙酸(MPA)作為基底膜，成功將制備出的檸檬黃-牛血清白蛋白偶聯(lián)物結合到傳感器芯片上。利用抗體與抗原的特異性結合，通過溶液競爭法實現(xiàn)了檸檬黃的檢測。建立了檢測檸檬黃的標準曲線，檢測限為12.80μg/L;獲得了pH為7.4的適宜體系酸度。同時檢測了樣品橙色飲料中的檸檬黃含量。與紫外檢測法相

5、對比，此方法對檸檬黃表現(xiàn)出更高選擇性和更好的靈敏度。
　　最后，運用分子自組裝技術，本文還構建了鍵合SH-β-CD的功能型SPR生物傳感器，并且利用構建的傳感器研究了β-CD與蘇丹紅Ⅰ相互作用。結果表明在實驗的濃度范圍內SPR傳感器信號對蘇丹紅Ⅰ濃度的對數(shù)有良好線性關系，相關系數(shù)達到0.9952。通過紫外光譜法和紅外光譜法表征制備的蘇丹紅Ⅰ-β-CD結合物，探討β-CD與蘇丹紅Ⅰ相互作用的機理。同時利用電化學交流阻抗進一步表征了構