金納米星的制備表征及構(gòu)建SERS探針用于肺細(xì)胞的研究.pdf

1、表面增強(qiáng)拉曼散射（surface-enhanced Raman scattering，SERS）作為一種發(fā)展迅速的光譜分析技術(shù)，在物理、化學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物、公共安全、環(huán)境檢測(cè)等社會(huì)生活的各個(gè)方面都有著越來(lái)越多的應(yīng)用。由于金屬納米粒子的光學(xué)及電化學(xué)特性強(qiáng)烈依賴于其自身的尺寸和形貌，并且有尖銳邊緣和枝角的金屬納米粒子對(duì)局域電介質(zhì)環(huán)境的改變更加敏感，還會(huì)極大地增強(qiáng)周圍的電場(chǎng)強(qiáng)度，因此枝角狀金納米結(jié)構(gòu)（如金納米星、金納米花等）可以更好地應(yīng)用于表面

2、增強(qiáng)拉曼的研究。近年來(lái)已有不少小組報(bào)道了枝角狀金納米結(jié)構(gòu)的制備方法及應(yīng)用，也已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞的SERS研究等領(lǐng)域。本文首先采用了種子介導(dǎo)生長(zhǎng)法制備出形貌可控、單分散性良好且尺寸均一的金納米星，然后，對(duì)制備得到的金納米星進(jìn)行了一系列的表面修飾，得到具有SERS活性的標(biāo)記分子并研究了它們的SERS效應(yīng)，最后，構(gòu)建了一種連接抗體的金納米星SERS探針，實(shí)現(xiàn)其在細(xì)胞成像及細(xì)胞區(qū)分中的應(yīng)用研究。
　　具體工作內(nèi)容如下:
　　1.首

3、先采用修飾的種子介導(dǎo)法，用檸檬酸鈉還原氯金酸(HAuCl4)的方法制備得到金種子備用，接著同時(shí)以檸檬酸鈉和對(duì)苯二酚作為還原劑共同作用得到金納米星。通過(guò)改變生長(zhǎng)液中對(duì)苯二酚和HAuCl4的濃度以及金種子的體積，可控地制備出不同形貌和尺寸的金納米星。同時(shí)還研究了對(duì)苯二酚，HAuCl4和金種子對(duì)金納米星合成過(guò)程的影響，利用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)和掃描電子顯微鏡(SEM)對(duì)制得的金納米星的光學(xué)性質(zhì)和表面形貌進(jìn)行了表征，目的在于優(yōu)化制備金納米星的條

4、件，得到單分散性好、形貌均一且直徑均勻的金納米星。
　　2.然后在大規(guī)模制備出形貌均一且單分散性良好的金納米星的基礎(chǔ)上，依次在金納米星表面包被拉曼信號(hào)染料尼羅蘭(NBA)和穩(wěn)定劑牛血清蛋白(BSA)，最終得到生物相容性和穩(wěn)定性均良好的具有SERS活性的標(biāo)記分子，這些標(biāo)記分子可成功應(yīng)用于細(xì)胞的成像，如暗場(chǎng)成像以及熒光成像等。
　　3.最后介紹了一種具有較高檢測(cè)靈敏性的連接CD44抗體的金納米星SERS探針的制備及應(yīng)用，這種探針

5、可與腫瘤細(xì)胞中多表達(dá)的位于細(xì)胞膜上的跨膜糖蛋白CD44更充分地結(jié)合，通過(guò)比較不同肺細(xì)胞結(jié)合的探針的多少，達(dá)到區(qū)分正常細(xì)胞與癌變細(xì)胞的目的。在制備的形貌均一且單分散性良好的金納米星表面包裹保護(hù)劑和穩(wěn)定劑，吸附拉曼信號(hào)染料4-巰基苯甲酸(4-MBA)產(chǎn)生拉曼信號(hào)，接著在相同的實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)正常肺細(xì)胞和癌變細(xì)胞進(jìn)行暗場(chǎng)成像和拉曼成像，分析得到最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。這種新型SERS探針的構(gòu)建對(duì)區(qū)分正常細(xì)胞和癌變細(xì)胞具有良好的應(yīng)用前景，并且有望用于癌癥的