黃酮類化合物的雌激素樣活性及其構效關系研究.pdf

1、絕經后骨質疏松癥是由于女性在絕經后體內雌激素水平驟然下降，導致骨鈣的流失而引起的。應用雌激素替代治療(ERT)可明顯減輕婦女絕經期癥狀、預防骨質疏松，但長期應用ERT卻可能引發(fā)子宮內膜癌、乳腺癌和陰道出血等副作用。
　　 植物雌激素是治療骨質疏松的有效途徑之一，在體內既可以啟到雌激素樣作用，又避免了使用雌二醇帶來的副作用，其代表是被廣泛認為具有雌激素樣作用的Daidzein和Genistein，他們同屬于黃酮類化合物。為了設計出

2、更加有效的化合物來滿足臨床治療絕經后骨質疏松癥和其他一些雌激素缺乏而引起的病癥，本實驗采用了E-SCREEN體系，對幾種黃酮類化合物的雌激素樣作用的構效關系進行了研究。基于此，我們設計并開展了一系列實驗研究，主要包括：
　　 (1)E-SCREEN體系的建立；
　　 (2)金雀異黃酮與大豆苷元的雌激素樣活性與構效關系研究；
　　 (3)淫羊藿苷及其擬代謝物的雌激素樣作用研究；
　　 (4)木犀草素與芹菜素

3、的雌激素樣作用體外研究；
　　 (5)柑橘素和芹菜素的雌激素樣作用體外研究。
　　 本實驗用10-7、10-8、10-8、10-10mol·L-1濃度的各受試黃酮類化合物處理細胞后，MTT法測定MCF-7增殖率，增殖細胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA)免疫組化法檢測其對體外培養(yǎng)MCF-7細胞增殖及細胞周期的影響；Real-time RT-PCR法檢測ERα、ERβ、

4、PR和PS2 mRNA表達水平變化。Western-blot法檢測ERα蛋白表達水平變化。
　　 雌激素樣活性結果：金雀異黃酮＞芹菜素：金雀異黃酮＞大豆苷元；芹菜素＞木犀草素；芹菜素＞木犀草素；淫羊藿素＞脫水淫羊藿素＞淫羊藿次苷I＞淫羊藿苷。結果表明：
　　 (1)黃酮母核B環(huán)的位置影響雌激素樣活性大小，在3號位更強；
　　 (2)黃酮類母核AC雙環(huán)5位碳原子上的羥基可以增強雌激素樣活性；
　　 (3)B

5、環(huán)的5’位置羥基(-OH)影響雌激素樣活性大?。?br>　　 (4)用C-C單鍵取代了芹菜素的黃酮母核AC雙環(huán)的2和3號碳原子之間的C=C共軛雙鍵而活性大大增強；
　　 (5)糖基阻礙與ER結合，活性降低；
　　 (6)異戊烯基阻抑了雌激素活性。
　　 本文篩選出了幾種雌激素樣活性較為強烈的黃酮類化合物：淫羊藿素，金雀異黃酮等；基本闡明了具有雌激素樣活性的黃酮類化合物的結構與效能的關系；探討了ERβ特殊的對雌激