釀酒酵母MAPK途徑及VPS家族基因?qū)︽k離子耐受調(diào)節(jié)的鑒定.pdf

1、鎘是一種常見的環(huán)境污染物和人體致癌物。鎘對細(xì)胞產(chǎn)生多種影響,包括細(xì)胞的增殖,分化,凋亡,以及其他的細(xì)胞活動(dòng)。通過對釀酒酵母基因組的篩選,我們確定了94個(gè)鎘離子敏感的基因缺失株。其中有29個(gè)基因已經(jīng)報(bào)道與空泡蛋白分選(VPS)功能有關(guān)。其中的17個(gè)VPS基因缺失株的敏感表型與細(xì)胞應(yīng)答鎘離子氧化脅迫表現(xiàn)出的胞內(nèi)離子濃度相符合。這些缺失的基因的主要功能是GTP／ATP酶、ESCRT復(fù)合物和HOPS復(fù)合物的亞基。因此可以證明這些大分子物質(zhì)與維持

2、細(xì)胞內(nèi)鎘離子濃度有關(guān)。
　　 此外,其余的65個(gè)鎘離子敏感缺失株對應(yīng)的基因涉及到多種功能,包括轉(zhuǎn)錄與脅迫調(diào)節(jié),信號轉(zhuǎn)導(dǎo),細(xì)胞周期相關(guān)的基因等。表型驗(yàn)證結(jié)果證實(shí),MAPK級聯(lián)系統(tǒng)中的高滲甘油途徑(HOG)與細(xì)胞壁完整性途徑(CWI)中的兩個(gè)核心組分PBS2和BCK1基因缺失株對鎘離子表現(xiàn)出敏感性。為了深入研究,我們構(gòu)建了分別由HOG途徑和CWI途徑調(diào)控的三個(gè)報(bào)告基因STL1p-lacZ,CWP1p-lacZ和MPK1p-lacZ。