降解柑橘囊衣Aspergillus aculeatus ZC-1005的篩選及其應(yīng)用基礎(chǔ)研究.pdf

1、為了提高柑橘酶法脫囊衣用酶的專一性、高效性和工業(yè)化可行性，本研究旨在通過限制性篩選，獲得具備降解柑橘囊衣能力的產(chǎn)半纖維素酶菌株。并以該菌株為研究對象，對其產(chǎn)酶過程及酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究，為其在柑橘加工業(yè)中的應(yīng)用提供一定理論基礎(chǔ)。
　　本研究主要包括以下部分:
　　(1)通過底物限制性初篩和復(fù)篩，獲得一株具備降解柑橘囊衣能力的主產(chǎn)半纖維素酶菌株。通過表型鑒定和分子生物學(xué)手段將該菌株鑒定為曲霉屬棘胞曲霉，命名為Aspergillus

2、 aculeatus ZC-1005。
　　(2)通過單因素和響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，最終確定最佳產(chǎn)酶條件為:4％麩皮為碳源，0.7％ NaNO3為氮源，接種濃度105個/mL，初始pH7.16，裝液量10mL，37.5℃，170 r/min搖床培養(yǎng)66.5 h，在此條件下木聚糖酶活達(dá)153.6 U/mL。
　　(3)采用微波獨(dú)立預(yù)處理麩皮，最終在輻射時(shí)間8 min、功率350 W、料水比1∶5的條件下，木聚糖酶活為176.6 U/

3、mL，比處理前提高12％。掃描電子顯微鏡和紅外光譜分析顯示，麩皮內(nèi)部結(jié)構(gòu)因受到輻射作用發(fā)生了明顯改變。
　　(4)粗酶液經(jīng)透析除鹽、Sephadex G-100凝膠層析后，獲得電泳級木聚糖酶洗脫組分。經(jīng)過蛋白質(zhì)電泳分析，確定該木聚糖酶分子量為28970 Da。酶學(xué)性質(zhì)研究表明:該木聚糖酶最適反應(yīng)溫度55℃，pH5.0，在此條件下木聚糖酶活為195.2 U/mL。并且在溫度50℃以下，pH5.0時(shí)表現(xiàn)出較好的熱穩(wěn)定性和酸堿耐受性。<