高效毛細管電泳用于食品及藥品分析的方法探究.pdf

1、毛細管電泳(Capillary Electrophoresis,CE)是一種不斷發(fā)展的分離分析技術。相比于其他分離方法,具有分離效率高、選擇性好和分析時間短等優(yōu)點。在過去的幾十年中,CE因其可根據(jù)分析物類別的不同而提供多種不同的分離模式成為各界關注的焦點?，F(xiàn)在CE已廣泛應用于諸多領域,如食品分析、分子生物學、醫(yī)藥及環(huán)境監(jiān)控等。目前的主要發(fā)展方向是技術的完善和應用研究。
　　本文探索了CE技術在食品與藥品分析中的應用,采用簡便高效的

2、樣品處理技術與CE進行連用應用于食品中相關組分的檢測研究,擴展了CE在藥品和食品領域中的應用。將試驗設計和人工神經網絡應用于CE分離結果的預測。建立了食品和藥品分析的CE方法,并與HPLC法相比對。
　　第一章綜述部分,對CE的基本原理和分離模式進行了簡單介紹。綜述了毛細管電泳技術在藥物和食品分析領域中的應用,闡明了本論文的研究目的與意義。
　　第二章建立了分散液液微萃取(DLLME)–非水毛細管電泳(NACE)法用于水果和

3、果汁中抑霉唑(IMZ)、咪鮮胺(PZ)和噻苯咪唑(TBZ)的檢測。NACE背景緩沖液的組成為含有30mmol/L氯化銨和0.5％磷酸的甲醇-乙腈(35:65,v/v)混合溶液。實驗對樣品前處理DLLME方法的萃取劑和分散劑類型與用量、樣品溶液pH、鹽含量、萃取方式和萃取時間進行了優(yōu)化。80μL三氯甲烷為萃取劑,0.5mL四氫呋喃為分散劑,樣品溶液pH為6.0,氯化鈉加入量為0.25g,渦旋10s。方法的檢出限范圍為4.67~7.19ng

4、/mL,對樣品(蘋果、圣女果、葡萄汁)檢測的回收率為72%~102%,相對標準偏差(RSD)小于6.4%。
　　第三章建立了一種快速簡單的測定水產品中甲醛的膠束電動毛細管色譜法(MEKC)。采用2,4-二硝基苯肼為衍生試劑,甲醛經衍生后用所建立的MEKC法進行測定。分離測定在熔融石英毛細管(75μmI.D;有效長度50.5cm)內進行,分離電壓25kV,溫度25℃,背景緩沖液為pH=9.0的20mmol/L硼砂和20mmol/LS

5、DS混合溶液,30mbar下進樣3s。分離在6.5min內完成。標準曲線的線性范圍為2~100mg/L,線性相關系數(shù)為0.999。檢出限(LOD)和定量限(LOQ)分別為0.57和1.89μg/mL。樣品經水蒸汽蒸餾處理,方法的回收率為83.7%~97.2%。
　　第四章建立了響應面優(yōu)化法(RSM)和人工神經網絡(ANN)與毛細管電泳法相結合用于復方呋塞米片中呋塞米(FUR)和鹽酸阿米洛利(AM)的分離測定。本實驗采用Box-Be

6、hnken設計優(yōu)化CE分離條件,利用人工神經網絡中的徑向基函數(shù)神經網絡(RBFNN)預測CE最佳分離結果。獲得最優(yōu)分離條件為16mmol/LNaH2PO4背景緩沖液,pH=7.21,分離電壓24kV,30mbar下進樣6s,UV檢測波長223nm。AM和FUR的電泳分離在5min內完成,檢出限分別為0.31μg/mL和0.66μg/mL。該方法成功應用于復方呋塞米片中AM和FUR的測定,方法精密度(RSD)小于2.2%,回收率為98.8

7、%~102.5%。該方法與中國藥典中高效液相色譜法(HPLC)進行了比對。兩種方法的測定結果一致,但CE的分析時間顯著縮短,而且具有試劑消耗量少的優(yōu)點。
　　第五章建立了毛細管區(qū)帶電泳法(CZE)用于復方甲苯咪唑片中甲苯咪唑和鹽酸左旋咪唑的分離測定。分離在60cm(有效長度50.5cm)×75μmI.D的熔融石英毛細管內進行,背景緩沖液為20mmol/L,pH=3.0的NaH2PO4溶液,分離電壓25kV。組分在8min內獲得良好

8、的分離;鹽酸左旋咪唑和甲苯咪唑的的檢出限分別為1.43和2.50μg/mL;標準曲線的線性范圍為10~500μg/mL,線性相關系數(shù)R2大于0.999;平均回收率大于96%。與中國藥典(2010,II)中HPLC法進行了比對,結果顯示,所建立的CZE法在線性、靈敏度、精密度和準確度上與HPLC法相一致,但CZE法的分析時間縮短,有機溶劑消耗量降低。證實了CE法可以作為HPLC法的高效、低成本的良好替代方法。
　　第六章建立了一種非

9、水毛細管法(NACE)用于復方甲苯咪唑片中甲苯咪唑和鹽酸左旋咪唑的測定。最優(yōu)NACE分離條件為:檢測波長210nm,含有10mmol/L氯化銨的甲醇-乙腈(40:60,v/v)混合溶液為非水背景緩沖液,分離電壓25kV。鹽酸左旋咪唑和甲苯咪唑的遷移時間分別為2.67min和3.82min,兩個組分的線性范圍均為5~200μg/mL,線性相關系數(shù)均大于0.999。方法的系統(tǒng)適用性、線性和精密度都獲得了良好的結果。鹽酸左旋咪唑和甲苯咪唑的檢