秸稈對家蠅幼蟲木質纖維代謝酶的誘導、表達及木質纖維降解菌的篩選.pdf

1、目的：研究家蠅對農業(yè)秸稈的消化利用及體內相關糖苷水解酶基因的誘導表達，篩選體內降解纖維素、木質素、半纖維素的共生菌，為今后家蠅作為資源化昆蟲對秸稈等生物質能的合理利用和開發(fā)奠定科學基礎。
　　方法:
　　1.使用含30％麥麩的高粱秸稈粉、30%麥麩的麥秸稈粉和純麥麩分別飼養(yǎng)家蠅幼蟲，檢測處理前后及無幼蟲培養(yǎng)對照組飼料中粗蛋白、粗脂肪、總糖、纖維素、木質素、半纖維素含量變化；同時觀察三個實驗組的幼蟲期、3日齡幼蟲體重、蛹期、羽

2、化率、成蟲存活期及雌雄比。
　　2.家蠅內參基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)在不同飼料飼養(yǎng)、不同發(fā)育期及不同組織的穩(wěn)定性研究；將2.5g的純木質素、纖維素、木聚糖（半纖維素）溶于20ml滅菌水，均勻混于濕度適宜的麥麩(50g干重)中飼養(yǎng)家蠅幼蟲，觀察BG、BGL、LAC、MAN基因的表達差異；使用純高粱秸稈、麥秸稈代替麥麩飼養(yǎng)家蠅，依次傳代，觀察家蠅上述基因在家蠅傳代過程中的表達差異。
　　3.用純麥麩、高粱秸桿、麥

3、秸稈喂養(yǎng)家蠅幼蟲后，分別用纖維素-剛果紅培養(yǎng)基、木質素培養(yǎng)基、木聚糖培養(yǎng)基在需氧和厭氧條件下篩選纖維素降解真菌、木質素降解真菌和細菌、半纖維素降解細菌和真菌，觀察不同飼養(yǎng)組的菌落形態(tài)、數(shù)量。
　　結果：
　　1.不同組飼養(yǎng)后及對照組的總糖、纖維素、木質素、半纖維素含量較飼養(yǎng)前都有一定程度的降低(P<0.05)，且家蠅幼蟲處理后比對照組降低的百分點更多（P<0.05）；麥麩組、高粱秸稈組處理后及對照組相比處理前脂肪含量增加（P

4、<0.05）；高粱秸稈組和麥秸稈組的家蠅處理后飼料及對照組與處理前相比，粗蛋白含量都升高(P<0.05)。
　　2.家蠅GAPDH基因在不同飼料飼養(yǎng)、不同發(fā)育期及不同組織的表達差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，表達較穩(wěn)定。
　　3.使用高粱秸稈粉，麥秸稈粉和麥麩分別飼養(yǎng)家蠅，我們發(fā)現(xiàn)幼蟲期、蛹期、羽化率、成蟲存活期及3日齡幼蟲體重均表現(xiàn)差異性(P<0.05)，成蟲雌雄比例無差異。
　　4.使用木質素、纖維素、半纖維素喂

5、養(yǎng)刺激家蠅后，家蠅BG、BGL、LAC、MAN基因均呈現(xiàn)上調(P<0.05)，但上調幅度各有不同。
　　5.以麥麩為對照組，上述基因在高粱秸桿組和麥秸稈組傳代中均呈現(xiàn)上調(P<0.05)，趨勢不同。
　　6.篩選的能降解纖維素、半纖維素、木質素的需氧真菌數(shù)量均大于厭氧真菌，細菌數(shù)量大于真菌數(shù)量(P<0.05)。纖維素降解真菌數(shù)量呈現(xiàn)高粱秸稈組>麥麩組>麥秸稈；木質素降解細菌、真菌數(shù)量均表現(xiàn)為高粱桿組>麥秸稈組>麥麩組；半纖維