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1、3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸鹽(Anesthetic tricaine mesilate),俗稱MS-222,是目前在世界范圍內(nèi)廣泛使用的漁用麻醉藥物,由于它使用方便,安全性高,麻醉效果明顯并且對(duì)處理過的魚蝦類和人體本身都沒有傷害,已經(jīng)經(jīng)過美國(guó)食品藥物管理局(FDA)的認(rèn)證,得到越來越廣泛的應(yīng)用。盡管這種藥物是安全的,它在許多國(guó)家都沒有允許用作獸藥,因而在這種情況下,3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸鹽在任何水產(chǎn)品中都不得檢出。為了保證食用安全,
2、必須嚴(yán)格監(jiān)控該藥物在水產(chǎn)品中的殘留。檢測(cè)水產(chǎn)品中MS-222的殘留濃度可以進(jìn)一步提高食用水產(chǎn)品的安全性以及可靠性,因此有必要建立水產(chǎn)品中MS-222的檢測(cè)方法,并對(duì)其在水產(chǎn)品中的富集及消除規(guī)律進(jìn)行研究。
首先,本論文建立了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水產(chǎn)品中麻醉劑3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸鹽(MS-222)殘留量的方法。樣品用50%的甲醇以及醋酸-醋酸鈉緩沖溶液(pH=4.2)進(jìn)行提取,提取液經(jīng)C18固相萃取柱凈化處理后用液相
3、色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行測(cè)定,外標(biāo)法定量。色譜柱采用MGⅡC18色譜柱,以0.5%的甲酸溶液和乙腈(v:v=60:40)為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,流速為0.2mL/min。在電噴霧電離源正離子模式下,取m/z166作為母離子,m/z138作為定量離子,m/z77作為定性離子。本方法在水產(chǎn)品中的檢測(cè)限為1μg/kg,在數(shù)十種空白樣品中的添加回收率均可以達(dá)到80%-110%,方法操作簡(jiǎn)便,重現(xiàn)性和回收率均較好。
其次,選擇一種水產(chǎn)品,
4、即大菱鲆,在12-13℃海水溫度下采用藥浴的方式對(duì)大菱鲆進(jìn)行麻醉確定MS-222對(duì)大菱鲆的有效濃度。通過觀察記錄大菱鲆在不同濃度的MS-222藥液中的麻醉效果,包括麻醉、蘇醒過程中的行為變化,呼吸頻率的變化以及藥浴60 h后的成活率,最終確定MS-222對(duì)大菱鲆的麻醉有效濃度為60 mg/L。
最后,進(jìn)行MS-222在大菱鲆體內(nèi)的富集和消除實(shí)驗(yàn),大菱鲆體長(zhǎng)20-25 cm,體重250-350 g/尾。藥浴濃度為60 mg/
5、L,富集實(shí)驗(yàn)持續(xù)60 h。隨后進(jìn)行消除試驗(yàn),每隔4 h隨機(jī)取出三條大菱鲆進(jìn)行MS-222濃度的測(cè)定。結(jié)果表明,MS-222在大菱鲆肌肉中的最高濃度可以達(dá)到4.78±1.88mg/g,而在肝臟中的蓄積能力更強(qiáng)一些,最高濃度可以達(dá)到6.79±1.51mg/g。肌肉和肝臟對(duì)于MS-222的消除時(shí)間也有差別,肌肉中為48 h,肝臟為52 h。由于影響水生生物藥代動(dòng)力學(xué)的因素較多,MS-222在不同大菱鲆體內(nèi)的消除情況有很大差異。因此,建議在12
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