蛹蟲草多肽制備分離及功能口服液加工工藝研究.pdf

1、蛹蟲草是一種和冬蟲夏草同屬異種的藥食兼用真菌，研究表明蛹蟲草含有與冬蟲夏草相近的功能物質及藥用功效。蛹蟲草主要的活性成分主要是蟲草多糖、腺苷、甘露醇、SOD酶和一些微量元素。當前報道較多的是關于蟲草素和蟲草多糖，而關于蛋白質制備多肽類的研究及其保健品的開發(fā)較少。本研究主要內容及結果如下:
　　以蛹蟲草子實體為原料，測定了蛹蟲草子實體基本成分和主要功能成分，其含量為:蛋白質28.73％，蟲草多糖21.85％，腺苷1.20％，蟲草素1

2、.08％，甘露醇3.824％。
　　本文采用堿提酸沉法提取蛹蟲草子實體中的蛋白質。分別通過單因素試驗和正交試驗對提取方法進行優(yōu)化。最終得到堿法提取蛹蟲草蛋白的最佳提取條件為:NaOH溶液濃度0.15mol/l，料液比1∶17.5，提取時間120min。采用酸沉法沉降蛹蟲草蛋白，分析得到pH4.6是蛋白質的等電點。
　　選取蛋白酶復合酶解，以水解度DH為指標，通過單因素和響應面試驗對水解條件進行優(yōu)化，最終確定水解的最佳條件為反

3、應時間為7.00h，pH為9.15，反應溫度為52.59℃，此時水解度最大，將此條件下的酶解液冷凍干燥。
　　利用Tricine-SDS-PAGE電泳和葡聚糖凝膠層析對蛹蟲草多肽進行初步分離純化，分析了蛹蟲草多肽的分子量范圍。電泳結果表明，酶解法制備的蛹蟲草多肽分子量主要集中分布在4722～7547Da附近;凝膠層析結果表明，酶解法制備的蛹蟲草多肽分子量主要分布在6674～28333Da和296～5343Da，多肽是小分子物質，可

4、知酶解液中分離的多肽分子量主要集中在296～5343Da。
　　選用體外化學模擬體系測定了蛹蟲草多肽的超氧陰離子自由基(O2-)清除能力，DPPH-自由基清除能力、羥自由基(-OH)清除能力和還原能力，當蛹蟲草多肽濃度為1.0mg/ml時，超氧陰離子自由基(O2-)清除率，DPPH-自由基清除率、羥自由基(-OH)清除率分別為37.80％、46.34％和43.21％，說明復合蛋白酶酶解制備的蛹蟲草多肽具有一定的清除自由基和抗氧化的

5、能力。
　　采用平板濾紙法考察蛹蟲草多肽的抑菌活性。試驗結果顯示，蛹蟲草多肽對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和沙門氏菌的抑菌結果均為陰性，表明酶法制備的蛹蟲草多肽對上述四種菌沒有抑菌活性。
　　研究了多肽口服液的生產工藝流程。酶解法制備的多肽液采用活性炭、β-環(huán)狀糊精和蘋果酸進行脫苦處理，主要添加白砂糖、檸檬酸、蜂蜜和甘氨酸進行調配，以感官評定為指標確定最佳配方組合，這四種物質的添加量為:白砂糖10％，蜂蜜3％，檸檬