基于微型表面等離子體共振系統(tǒng)的牛奶中抗生素殘留檢測(cè)研究.pdf

1、牛奶中的抗生素殘留是關(guān)系人民安全的公共衛(wèi)生事件,目前各國(guó)都高度關(guān)注牛奶中抗生素殘留的危害性,對(duì)其實(shí)施檢測(cè)和監(jiān)控具有重要的現(xiàn)實(shí)意義?；诒砻娴入x子體共振(surface plasmon resonance,SPR)檢測(cè)技術(shù)具有測(cè)量時(shí)間短,無(wú)需標(biāo)記,檢測(cè)精度高等優(yōu)點(diǎn)。因此,本課題對(duì)基于SPR測(cè)量牛奶中抗生素殘留的方法進(jìn)行了深入系統(tǒng)地研究。主要工作如下:
　　 分析了微型SPR在測(cè)量抗生素測(cè)量的最佳條件。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究重建方法,液體流

2、速、試劑的濃度等因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果制定一套最佳的實(shí)驗(yàn)測(cè)量條件和標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量的具體步驟。以氨芐青霉素為例,研究不同試劑、流速等對(duì)測(cè)量的影響,制定了相應(yīng)的流程給出最佳的測(cè)量條件,提高了測(cè)量精度和穩(wěn)定性。如流速在10μl/min的流速,重建溶液以70mM的NaOH最佳的實(shí)驗(yàn)條件等。完成了基于SPR抗生素測(cè)量的最佳實(shí)驗(yàn)條件研究。
　　 研究了基于SPR的牛奶抗生素殘留的直接測(cè)量法、間接測(cè)量法。采用表面等離子體共振的生物光學(xué)傳

3、感器的方法,利用生物分子相互作用分析原理及傳感器對(duì)折射率的高度敏感性,結(jié)合傳感器金膜表面綁定抗氨芐青霉素單克隆抗體的技術(shù),實(shí)現(xiàn)了牛奶中氨芐青霉素含量的定量檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)中利用微型表面等離子體共振傳感器構(gòu)建了測(cè)量系統(tǒng),介紹了傳感器表面的處理方法,并對(duì)氨芐青霉素濃度為0ng/mL,10ng/mL,50ng/mL,100ng/mL的牛奶樣品進(jìn)行了測(cè)量,通過(guò)對(duì)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行分析,得到了不同氨芐青霉素濃度的傳感器響應(yīng)圖,結(jié)果表明,基于表面等離子體共振的

4、光學(xué)生物傳感器在牛奶抗生素藥物殘留檢測(cè)方面具有很好的應(yīng)用前景,這兩種方法都能夠簡(jiǎn)單快速地對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)量,克服了傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)。直接測(cè)量法測(cè)量牛奶中氨芐青霉素的最低檢測(cè)限達(dá)到33.6mg/dL,間接測(cè)量法對(duì)于氨芐青霉素的最低檢測(cè)限達(dá)到50ng/mL。
　　 利用微型表面等離子體共振的生物傳感器測(cè)量了殘留在牛奶中的氨芐青霉素的濃度。采用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)的方法,即先將定量的單克隆抗氨芐青霉素抗體(3H295)和含氨芐青霉素的牛奶樣品混合,