Puroindolinea對四倍體硬粒小麥淀粉及面筋蛋白特性的影響.pdf

1、籽粒硬度是小麥品種分類和市場分級定價(jià)的重要指標(biāo)之一，決定了小麥的磨粉品質(zhì)，對小麥的終用途品質(zhì)也有重要影響。小麥籽粒硬度由兩個(gè)主效基因Purodinoline a（Pina）和Puroindoline b（Pinb）共同決定，兩者位于5D染色體短臂Ha位點(diǎn)上。研究表明，Pina和Pinb中任意一個(gè)基因發(fā)生突變或沉默均會(huì)造成小麥籽粒質(zhì)地變硬。
　　Pina和Pinb基因通過控制小麥籽粒硬度，間接影響小麥的加工品質(zhì)。為了進(jìn)一步的探索小麥

2、籽粒硬度和食品加工品質(zhì)存在的內(nèi)在關(guān)系，在實(shí)驗(yàn)室前期獲得的表達(dá)外源PINA四倍體硬粒轉(zhuǎn)基因小麥純合株系的研究基礎(chǔ)上，主要從小麥淀粉特性和面筋蛋白特性入手，試圖探求在轉(zhuǎn)基因小麥中，Pina基因?qū)π←湹矸酆兔娼畹鞍滋匦缘挠绊?，進(jìn)而改變小麥的加工品質(zhì)特性，具體研究結(jié)果如下：
　　(1)通過對轉(zhuǎn)基因及對照株系的淀粉損傷及面粉吸水性的分析，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因株系中破損淀粉的含量較少，面粉吸水性減少，表明轉(zhuǎn)入Pina基因后，導(dǎo)致籽粒硬度變軟，破損淀粉減

3、少，吸水性減少，與預(yù)期結(jié)果相符；
　　(2)通過檢測小麥淀粉粒徑，分析發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因株系顆粒累積分布100％時(shí)所對應(yīng)的直徑大于對照株系，面粉顆粒較大，破損淀粉含量較少，與淀粉損傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致；
　　(3)通過對轉(zhuǎn)基因及對照株系面粉的蛋白質(zhì)相關(guān)參數(shù)測定，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因株系的面粉蛋白質(zhì)含量和面筋指數(shù)均比野生型要小，反映了較差的面粉加工品質(zhì)，推測Pina基因降低了籽粒硬度，通過影響磨粉品質(zhì)影響其加工品質(zhì)；
　　(4)利用粘度糊化分析

4、技術(shù)對轉(zhuǎn)Pina基因株系和野生型對照株系進(jìn)行淀粉糊化特性分析，發(fā)現(xiàn)由于轉(zhuǎn)基因株系中的破損淀粉含量減少，淀粉總體的結(jié)合力比對照株系大，導(dǎo)致PV值和FV值上升；
　　(5)利用兩種不同的方法從轉(zhuǎn)基因和對照植株系面粉中將單體、寡聚體和多聚體蛋白提取出來，結(jié)合SDS-PAGE和Western Blot技術(shù)，研究Pina基因表達(dá)對四倍體小麥的內(nèi)源儲藏蛋白表達(dá)的影響以及PINA蛋白在總蛋白的分布情況，發(fā)現(xiàn)PINA蛋白在正丙醇可溶性的單體和寡聚