香菇多糖提取和β-葡萄糖苷酶應(yīng)用研究.pdf

1、香菇中的香菇多糖具有抗癌、抗腫瘤等多種生物活性。香菇β-葡萄糖苷酶在食品加工、生產(chǎn)中有著廣泛的應(yīng)用。本試驗以香菇為原料，探索從其中提取香菇β-葡萄糖苷酶，水解大豆異黃酮和豆渣；提取香菇β-葡萄糖苷酶后剩余的香菇渣中還含有部分的香菇多糖，對其進一步提取純化，主要通過熱水浸提、超聲輔助提取、微波輔助提取和亞臨界水提取四種方法提取香菇多糖，醇沉后并用Sevag法除去香菇多糖中的蛋白。并測定香菇多糖的抗氧化活性。
　　 測定多糖的方法主

2、要是用3.5-二硝基水楊酸法測定還原糖的含量，通過苯酚-硫酸法測定溶液中的總糖的含量，換算得到多糖的含量。本試驗對苯酚-硫酸方法進行了進一步研究，確定了該方法有很好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性，確定測定多糖最佳波長為490nm，最佳的提取液稀釋倍數(shù)為200倍。
　　 采用熱水浸提法提取香菇多糖時，通過單因素試驗和正交試驗，確定了最佳的熱水浸取條件：提取溫度100℃，液固比40mL/g，提取時間3h，提取2次。采用超聲輔助法提取香菇多糖時，通

3、過單因素試驗和正交試驗，確定了最佳超聲輔助提取條件：提取溫度70℃，超聲時間45min，液固比30mL/g，超聲功率80W，提取2次。采用微波輔助法提取香菇多糖時，通過單因素試驗和正交試驗，確定了最佳微波輔助提取條件：浸提溫度90℃，微波萃取時間10min，液固比25mL/g，微波功率是800W，提取2次。采用亞臨界水法提取香菇多糖時，通過單因素試驗和正交試驗，確定了最佳亞臨界水法提取條件：亞臨界水溫度150℃，液固比30mL/g，浸提

4、時間為5min，浸提次數(shù)為2次。
　　 四種方法最佳條件下提取香菇多糖得率為：熱水浸提法4.90％，超聲輔助提取法5.17％，微波輔助提取法4.83％，亞臨界水法7.63％；提取時間依次為：3h，45min，10min，5min；液固比依次為40mL/g，30mL/g，25mL/g，30mL/g；提取溫度依次為100℃，70℃，90℃，150℃。由以上數(shù)據(jù)可知，熱水浸提法提取香菇多糖的耗時最長，料液比較大，溫度要求高；超聲輔助提

5、取法相對于傳統(tǒng)熱水浸提法，提取時間縮短很多，液固比也減小，溫度要求最低。微波輔助提取法提取時間相對于以上兩種方法提取時間又縮短一些，液固比也相對減小，但是香菇多糖的得率稍微有所下降。亞臨界水提取方法提取率最高，提取瞬間完成。在實際生產(chǎn)過程中，要根據(jù)實際情況選擇適宜的提取方法。
　　 通過醇沉試驗選擇的最佳乙醇醇析終濃度為80％。Sevag法除蛋白的選定因素、水平進行正交試驗。得到Sevag法對香菇多糖提取液除蛋白的最優(yōu)條件振蕩時

6、間為2min、靜置時間20min、樣液與Sevag試劑體積比為2:1、氯仿與正丁醇體積比為3:1。粗多糖樣品經(jīng)四次Sevag法純化多糖純度達到92.26％。
　　 進行了香菇β-葡萄糖苷酶水解豆渣的研究。香菇β-葡萄糖苷酶水解鮮豆渣試驗中，水溶性多糖含量由0.21g/L增加到0.27g/L；水解55℃下烘干豆渣試驗中，水溶性多糖含量由0.80g/L增加到1.24g/L；水解90℃下烘干豆渣試驗中，水溶性多糖含量由0.52g/L增

7、加到0.78g/L。采用豆渣酶解途徑進行放大實驗，取55℃下烘干豆渣100g，選用香菇β-葡萄糖苷酶進行水解，水溶性多糖含量由0.82g/L增加到1.26g/L，水溶性多糖含量增加了54％。
　　 進行了香菇β-葡萄糖苷酶水解大豆異黃酮的研究。香菇β-葡萄糖苷酶水解大豆異黃酮后，得到產(chǎn)品1.6g，黃豆苷水解率為98.15％，染料木苷水解率94.23％。
　　 對香菇多糖進行了抗氧化活性測定研究，研究結(jié)果表明，香菇多糖具有