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1、長(zhǎng)期攝入化學(xué)有機(jī)污染物所造成的潛在食源性危害已日漸成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。及時(shí)檢出和控制這些危害物,對(duì)保證食品安全和保障人民健康至關(guān)重要。目前常用的檢測(cè)方法大多耗時(shí),對(duì)檢測(cè)儀器要求高,不適于現(xiàn)場(chǎng)篩查檢測(cè)。因此急需開發(fā)快速、靈敏、自動(dòng)化程度高的分析方法,以滿足食品安全現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的要求。本研究選擇常見的有機(jī)污染物萊克多巴胺和氯霉素作為待測(cè)目標(biāo)物,構(gòu)建了三種以血糖儀為檢測(cè)器的高靈敏、高選擇性的即時(shí)傳感器,利用β-環(huán)糊精的主客體識(shí)別作用對(duì)待測(cè)目標(biāo)
2、物進(jìn)行捕獲和富集,以鏈狀多聚螯合物EnVision作為載體制備蔗糖酶信號(hào)探針,實(shí)現(xiàn)了目標(biāo)物信號(hào)的轉(zhuǎn)換和放大,有望應(yīng)用于食品中多種有機(jī)污染物的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)分析。
1、基于磁性環(huán)糊精納米粒子的萊克多巴胺現(xiàn)場(chǎng)免疫檢測(cè)方法
建立了一種現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)食品中萊克多巴胺的免疫分析方法。通過β-環(huán)糊精修飾的磁性納米粒子(Fe3O4@SiO2-CD)對(duì)樣品中的萊克多巴胺進(jìn)行預(yù)富集,標(biāo)記蔗糖轉(zhuǎn)化酶的信號(hào)探針用于將蔗糖催化水解為葡萄糖,之后使用
3、血糖儀進(jìn)行檢測(cè)。蔗糖轉(zhuǎn)化酶修飾的金納米粒子和萊克多巴胺抗體共固定在EnVison試劑上,由于EnVison酶負(fù)載量高,得到的共聚物能夠很好的放大信號(hào)。依據(jù)萊克多巴胺濃度與產(chǎn)生的葡萄糖量間的線性關(guān)系定量,以此測(cè)定萊克多巴胺濃度。本方法在檢測(cè)豬肉樣品中萊克多巴胺的檢測(cè)限可以達(dá)到0.34μg kg-1。2、基于分子印跡和環(huán)糊精主客體反應(yīng)檢測(cè)氯霉素的免抗體分析方法
構(gòu)建了一種免抗體的夾心分析方法來檢測(cè)動(dòng)物源食品中氯霉素的含量。這種夾心
4、策略基于磁性分子印跡納米材料和β-環(huán)糊精/蔗糖轉(zhuǎn)化酶功能化的信號(hào)探針。以氯霉素分子結(jié)構(gòu)的片段類似物2,2-二氯乙酰胺為模板分子,在Fe3O4納米粒子表面合成聚多巴胺分子印跡膜。通過β-環(huán)糊精的主客體結(jié)合,信號(hào)探針能夠特異性地識(shí)別氯霉素的硝基酚片段?;谶@種雙重特異性識(shí)別,磁性分子印跡、氯霉素和信號(hào)探針形成夾心產(chǎn)物。通過信號(hào)探針?biāo)庹崽?,產(chǎn)生的葡萄糖量用血糖儀進(jìn)行檢測(cè)。氯霉素的濃度與產(chǎn)生的葡萄糖量成對(duì)數(shù)比例,檢測(cè)的線性范圍為0.5-50
5、ng mL-1,檢測(cè)下限為0.16 ng mL-1(信噪比為3)。本方法的檢測(cè)時(shí)間約為1小時(shí),與傳統(tǒng)的ELISA相比較短。
3、基于DNA與環(huán)糊精納米材料主客體識(shí)別檢測(cè)氯霉素的適配體傳感器
基于信號(hào)探針上的β-環(huán)糊精與適配體互補(bǔ) DNA單鏈之間的主客體識(shí)別,構(gòu)建了一種用于檢測(cè)食品中氯霉素高親和力的適配體傳感器。適配體與其互補(bǔ) DNA雜交后,固定在Fe3O4@SiO2-Au納米粒子表面。加入氯霉素后,適配體會(huì)與氯霉素結(jié)
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