固態(tài)混菌發(fā)酵纖維素酶工藝研究.pdf

1、隨著世界經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，煤炭，石油等天然石化燃料日漸枯竭，能源與環(huán)境問(wèn)題是全人類(lèi)的共同問(wèn)題，各國(guó)政府都十分關(guān)注對(duì)新的能源來(lái)源的研究。纖維素類(lèi)物質(zhì)是自然界中最廉價(jià)、最豐富的一類(lèi)可再生資源。而目前對(duì)纖維素的利用率還很低，技術(shù)也不完善，造成大量資源的浪費(fèi)，也帶來(lái)了環(huán)境的污染。纖維素酶能將纖維素分解為糖類(lèi)，使纖維素便于利用。因而，纖維素酶的活性是影響纖維素利用率的關(guān)鍵因素，也制約纖維素利用在解決能源危機(jī)中起的作用。
　　 本實(shí)驗(yàn)利用紫外誘變

2、篩選的方法選育出優(yōu)良綠色木霉誘變株。通過(guò)單因素及正交實(shí)驗(yàn)考察綠色木霉誘變株較好的產(chǎn)酶條件，并對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化。聯(lián)合黑曲霉進(jìn)行混菌發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，考察混菌發(fā)酵試驗(yàn)條件并優(yōu)化，結(jié)論如下：
　　 (1)介紹了纖維素酶的相關(guān)知識(shí)、當(dāng)前纖維素酶發(fā)酵工藝的研究進(jìn)展及遇到的問(wèn)題。
　　 (2)通過(guò)紫外誘變育種的方法選育出產(chǎn)酶活性較高的綠色木霉誘變株，與原菌株相比，誘變株的產(chǎn)酶活性提高193％。
　　 (3)通過(guò)單因素考察，硫酸銨

3、的添加量，培養(yǎng)時(shí)間，培養(yǎng)溫度，培養(yǎng)基初始pH對(duì)產(chǎn)酶活性的影響較大。
　　 (4)通過(guò)正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，綠色木霉誘變株最好的產(chǎn)酶條件為：麩皮：秸稈：1：4(總5g)，料水比1:2，2％吐溫20，2％的硫酸銨，溫度30℃，培養(yǎng)時(shí)間120h，初始pH值4.4。產(chǎn)酶活性：FPA酶活為12.15 IU/g，C1酶活為16.57 IU/g，Cx酶活18.39 IU/g，β-葡萄糖苷酶酶活13.81IU/g。
　　 (5)通過(guò)綠色木霉酶與

4、黑曲霉的混菌發(fā)酵試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)菌種的接入次序、溫度的變動(dòng)、初始pH值，培養(yǎng)時(shí)間對(duì)混菌產(chǎn)酶的影響較大。
　　 (6)通過(guò)正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，混菌發(fā)酵最好的產(chǎn)酶條件為：麩皮：秸稈=1:4(總5g)，料水比1:2，2％吐溫20，2％的硫酸銨，pH值5.0，接入綠色木霉0.5mL于30℃培養(yǎng)3d后接入黑曲霉1.5mL于25℃2d，產(chǎn)酶活性FPA酶活17.45 IU/g提高43.62％，同時(shí)產(chǎn)C1酶活19.35 IU/g，Cx酶活20.56IU/g