雙親水型陽(yáng)離子聚合物的合成及作為基因載體性能的研究.pdf

1、基因治療作為一種全新的疾病治療手段，為惡性腫瘤、心腦血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病以及病毒性流行病等臨床治療難題提供了新的解決途徑。安全、高效的基因傳遞系統(tǒng)是基因治療成功應(yīng)用的重要因素之一，是基因治療研究領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)。傳統(tǒng)的病毒載體雖轉(zhuǎn)染效率較高，但安全性差并存在免疫原性。非病毒載體中的聚陽(yáng)離子載體以其安全性高、免疫原性低、易修飾等優(yōu)點(diǎn)吸引了眾多研究者的目光，但其遞送基因的轉(zhuǎn)染效率有待提高。本文基于聚乙烯吡咯烷酮（PVP）和聚甲基丙烯酸二甲氨

2、基乙酯（PDMAEMA）構(gòu)建了雙親水性聚陽(yáng)離子非病毒基因載體，并對(duì)其基因遞送性能進(jìn)行了研究。
　　本文首先利用N-溴代丁二酰亞胺（NBS）將PVP進(jìn)行溴化生成PVP-Br，然后以PVP-Br為大分子引發(fā)劑利用原子轉(zhuǎn)移自由基聚合（ATRP）合成了雙親水性接枝聚合物聚乙烯吡咯烷酮接枝聚甲基丙烯酸二甲氨基乙酯（PPD）并應(yīng)用在基因載體領(lǐng)域。在HepG2細(xì)胞上，PPD在無(wú)血清條件下具有良好的轉(zhuǎn)染效率。并且在10％的血清中PPD仍具有較高的

3、體外轉(zhuǎn)染效率，與在無(wú)血清中的轉(zhuǎn)染效率相比并無(wú)明顯降低?？梢姡瑥?fù)合物在血清中有很好的穩(wěn)定性。但PPD具有一定的毒性。
　　為進(jìn)一步提高PPD復(fù)合物的生物活性，在生理環(huán)境下可看作一種天然陰離子大分子的牛血清白蛋白（BSA）被用來(lái)與PPD復(fù)合物通過(guò)層層組裝形成三元復(fù)合物來(lái)改善載體的毒性和轉(zhuǎn)染效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，BSA的加入對(duì)二元復(fù)合物的穩(wěn)定性沒(méi)有影響，并且三元復(fù)合物表面電位可以調(diào)節(jié)。MTT法檢測(cè)復(fù)合物的毒性測(cè)試表明BSA可明顯降低載體的