飛秒激光誘變達托霉素高產(chǎn)菌株技術(shù)及其機理的研究.pdf

1、達托霉素（Daptomycin）是首個獲準上市的環(huán)脂肽類抗生素，是一類抗革蘭氏陽性菌的新型抗生素，具有在體外抗絕大多數(shù)的臨床革蘭陽性菌的作用，主要用于耐藥菌，如耐萬古霉素的腸球菌(VRE)，耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)等。目前達托霉素的生產(chǎn)主要采用玫瑰孢鏈霉菌（Streptomyces roseosporus）生物發(fā)酵法生產(chǎn)，現(xiàn)階段成本較高，產(chǎn)量較低。因此通過人工誘變得到穩(wěn)定高產(chǎn)的菌株，對于其工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)具有很重要的意義。本文以玫瑰

2、孢鏈霉菌為研究對象，以飛秒激光誘變?yōu)閷嶒炇侄危瑖@如何提高達托霉素的產(chǎn)量和質(zhì)量，對生產(chǎn)菌種的選育、發(fā)酵工藝等方面進行了系統(tǒng)研究，同時對誘變機理進行了初步的探討，獲得了如下結(jié)果：
　　 以玫瑰孢鏈霉菌原始菌株NRRL11375為出發(fā)菌，經(jīng)飛秒激光誘變處理(激光誘變參數(shù)：輸出功率5mW-30mW和輻照時間5-25s)，并選用藤黃八疊球菌作為抗性篩選菌，最終選育出一株達托霉素高產(chǎn)突變株JG-25-50，該菌7.5L生物發(fā)酵反應(yīng)器達托霉

3、素產(chǎn)量達到371.40mg/L，比出發(fā)菌株提高了18.3％。且菌株JG-25-50的遺傳性能穩(wěn)定。
　　 同時，本文還探討了飛秒激光誘變玫瑰孢鏈霉菌的機理，結(jié)合飛秒激光光束脈沖持續(xù)時間短、瞬時功率大、聚焦尺寸小的特點較系統(tǒng)的討論了激光照射微生物時發(fā)生的一系列機理變化：多光子吸收、形成等離子體、產(chǎn)生生物活性氧、DNA損傷自身修復(fù)等。最后，根據(jù)目前的研究情況，對本領(lǐng)域進行了展望并就飛秒激光誘變微生物技術(shù)及其機理的研究發(fā)展提出了建議。