中國人乳β-酪蛋白的分離和鑒定研究.pdf

1、人乳是最安全和最經(jīng)濟的嬰兒食品，含有嬰兒生長發(fā)育所必須的全部營養(yǎng)物質，在增強嬰兒抵抗力、促進組織生長發(fā)育等多方面發(fā)揮著重要的生物學功能。目前，我國6個月以下嬰兒母乳喂養(yǎng)率不足40％，有60％以上的嬰兒需要配方食品來為他們提供營養(yǎng)物質，再加上幼兒的需求，致使嬰幼兒配方乳的市場需求巨大。因此，開展人乳蛋白組分的研究，對于嬰幼兒配方乳品的研制具有重要的現(xiàn)實意義。相關產(chǎn)品的問世也將有效解決我國母乳喂養(yǎng)不足的問題。
　　 本研究以新鮮的中

2、國人乳為研究對象，通過離心脫脂，調(diào)節(jié)等電點沉淀蛋白，使得酪蛋白解離出來，對所得酪蛋白進行陰離子交換層析，分離出β-酪蛋白，并且β-酪蛋白被完全純化出來。通過Western-Blot和基質輔助激光解吸附電離子串聯(lián)飛行時間質譜法(MALDI-TOF/TOF MS)分別對分離洗脫液進行鑒定，證明β-酪蛋白能被成功的分離出來。主要研究工作和結論如下:
　　 1.在酸性條件下添加氯化鈣進行分離，從pH值、離心力、CaCl2溶液濃度，三個方

3、面對分離效果進行評價，經(jīng)過十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)法測定分離效果。結果表明:當pH=4.3，離心力為40000 g，CaCl2溶液濃度60 mmol/L時，分離得到的酪蛋白組分純度最高。
　　 2.人乳酪蛋白沉淀通過DEAE-Sepharose Fast Flow陰離子交換層析分離，對洗脫液進行SDS-PAGE電泳鑒定，初步判定，峰Ⅲ是人乳β-酪蛋白，其純度高于90％。
　　 3.對分離出的