抗蛋白質(zhì)非特異性吸附納米磁球的制備及其在免疫檢測中的應(yīng)用.pdf

1、免疫檢測技術(shù)（Immunoassay，IA）經(jīng)幾十年發(fā)展，正逐步實現(xiàn)定量、高靈敏度、高特異性、方便快速以及經(jīng)濟(jì)實用的目標(biāo)，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、食品、環(huán)境等檢測領(lǐng)域。以納米磁球作為固相載體的免疫檢測技術(shù)能夠進(jìn)一步提高檢測效率、靈敏度，簡化操作和節(jié)省檢測時間。本研究希望在現(xiàn)有納米磁球免疫檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上，添加抗蛋白質(zhì)非特異性吸附能力，減少蛋白質(zhì)在檢測過程中的干擾，提高固定抗體的生物反應(yīng)活性。
　　本研究采用表面引發(fā)原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法（

2、Surface-Initiated Atom TransferRadical Polymerization，SI-ATRP）在納米磁球表面接枝聚磺酸甜菜堿甲基丙烯酸酯(polySBMA)和聚羧酸甜菜堿甲基丙烯酸酯(polyCBMA)，經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附劑測定法(ELISA)表征，聚合物修飾后的納米磁球具有優(yōu)秀的抗蛋白質(zhì)非特異性吸附相能力（相對未修飾納米磁球的吸附值，分別為4±3％和3.25±0.21％）。通過探討polySBMA和polyC

3、BMA聚合物刷層(ploymer brush)在納米磁球表面的厚度與其抗蛋白質(zhì)非特異性吸附能力的關(guān)系，再次證實納米磁球的抗蛋白質(zhì)非特異性吸附能力與其表面聚合物刷層的厚度有關(guān)，且聚合物刷層過厚或過薄都不能達(dá)到理想的抗蛋白質(zhì)非特異性吸附效果，其存在一個最佳膜厚范圍（polySBMA的最佳膜厚為60～70 nm，polyCBMA的最佳膜厚為24.8±1.8 nm）。
　　并進(jìn)一步在polyCBMA修飾的納米磁球表面共價接枝抗β-hCG抗

4、體得到免疫納米磁球，該免疫納米磁球在表面接枝抗β-hCG抗體后仍保持接枝前的抗蛋白質(zhì)非特異性吸性能（吸附相對值小于5％），對低濃度人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotrop，hCG）(≤25mIU/mL)具有較低的檢測極限和很小的誤差分布。并在hCG溶液中加入胎牛血清來模擬復(fù)雜蛋白質(zhì)條件，在該條件下，經(jīng)polyCBMA修飾的免疫磁球仍保持良好的檢測線性和重現(xiàn)性，且該條件下的檢測數(shù)據(jù)與未加胎牛血清的理想檢測條