貞芪散對大鼠粘膜非特異性免疫影響及其臨床應(yīng)用研究.pdf

1、腸道粘膜免疫在清除和消除腸道病原微生物的過程中發(fā)揮著重要的作用。粘膜非特異性免疫作為腸道粘膜免疫主要組成部分，通過柱狀上皮細(xì)胞，杯狀細(xì)胞，潘氏細(xì)胞等非特異性免疫細(xì)胞和Lysozyme、防御素等非特異性免疫因子維持腸道穩(wěn)態(tài)。中藥免疫增強(qiáng)劑由于能增強(qiáng)機(jī)體免疫力，通過提高特異性免疫和非特異性免疫，解除部分免疫抑制，促進(jìn)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，在動物生產(chǎn)中已廣泛用于疾病的防治，如豬瘟、奶牛隱性乳房炎等。貞芪散，為淡棕黃色粉末，由黃芪和女貞子兩味中藥組成

2、，其主要功能是固表升陽，健脾益氣，扶正祛邪;恢復(fù)奶牛機(jī)體免疫力。
　　為闡明貞芪散對大鼠腸道非特異性免疫的影響。選取健康SD大鼠40只，體重在180-220g之間，隨機(jī)分為四組，即高劑量組、中劑量組、低劑量組和對照組。試驗期末留取40只大鼠的十二指腸、空腸和回腸組織，采用HE染色和免疫組織化學(xué)染色技術(shù)對小腸中潘氏細(xì)胞、defβ1免疫反應(yīng)細(xì)胞、Lysozyme免疫反應(yīng)細(xì)胞進(jìn)行定位、定性與定量分析。結(jié)果表明:潘氏細(xì)胞三五成群地分布在小

3、腸隱窩底部，呈錐體形，胞核呈圓形或卵圓形，胞質(zhì)中存在大量紅色顆粒。潘氏細(xì)胞數(shù)量在各實驗組及對照組SD大鼠腸道中，從十二指腸至空腸再至回腸依次遞增（P＜0.05）;各實驗組十二指腸和空腸潘氏細(xì)胞數(shù)量與對照組相當(dāng)(P＞0.05)，中劑量組回腸潘氏細(xì)胞數(shù)量高于對照組(P＜0.05)，高、低劑量組回腸潘氏細(xì)胞數(shù)量與對照組無顯著差異（P＞0.05）;在空腸，中劑量組潘氏細(xì)胞數(shù)量多于高劑量組(P＜0.05)，在回腸，中劑量組潘氏細(xì)胞數(shù)量多于低劑量組

4、(P＜0.05)。defβ1免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞主要分布在小腸絨毛固有層中，見于巨噬細(xì)胞，十二指腸、空腸、回腸defβ1陽性細(xì)胞數(shù)量依次遞減(P＜0.05);各實驗組defβ1陽性細(xì)胞與對照組差異不顯著(P＞0.05)。Lysozyme免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞主要分布于腸粘膜上皮細(xì)胞及隱窩中，主要見于柱狀上皮細(xì)胞、杯狀細(xì)胞和潘氏細(xì)胞;十二指腸陽性細(xì)胞數(shù)量高于空腸、回腸(P＜0.05)，空腸與回腸陽性細(xì)胞數(shù)量差異不顯著（P＞0.05）;在十二指腸，各

5、給藥組Lysozyme陽性細(xì)胞數(shù)量均顯著高于對照組(P＜0.05)，在空腸，中劑量組、高劑量組Lysozyme陽性細(xì)胞數(shù)量較對照組增加(P＜0.05)，在回腸，中劑量組Lysozyme陽性細(xì)胞數(shù)量高于對照組(P＜0.05)。
　　為探索貞芪散治療奶牛隱性乳房炎的可行性。選取3-7歲患有隱性乳房炎的青年經(jīng)產(chǎn)奶牛30頭，隨機(jī)分為6組，即高劑量組、中劑量組、低劑量組1、低劑量組2、藥物對照組和對照組，在試驗開始前，用藥后5天和停藥后5天

6、采集血液及奶樣，對血液學(xué)參數(shù)、血清細(xì)胞因子、CMT評分差及牛奶體細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果顯示:各給藥組、藥物對照組血液細(xì)胞學(xué)參數(shù)與對照組無顯著差異(P＞0.05)，各給藥組均可提高外周血中IgG、LT、TNF-α、IFN-γ、IL-2等細(xì)胞因子的水平，用藥后5天高劑量組、中劑量組、低劑量1組和藥物對照組CMT評分差顯著高于對照組(P＜0.05)，停藥后5天，各給藥組和藥物對照組CMT評分差均高于對照組(P＜0.05)。用藥后5天，低劑

7、量1組和藥物對照組牛奶體細(xì)胞數(shù)量顯著低于對照組(P＜0.05)，停藥后5天，低劑量組1、低劑量組2和藥物對照組牛奶體細(xì)胞數(shù)顯著下降(P＜0.05)。
　　結(jié)論:貞芪散可一定程度提高大鼠小腸各段潘氏細(xì)胞數(shù)量、defβ1陽性細(xì)胞數(shù)量和Lysozyme陽性細(xì)胞數(shù)量，對大鼠腸道粘膜免疫產(chǎn)生了一定促進(jìn)作用，且能提高奶牛外周血IgG、LT、TNF-α、IFN-γ、IL-2等細(xì)胞因子的水平，降低牛奶CMT評分和牛奶中體細(xì)胞數(shù)量，對奶牛隱性乳房炎