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文檔簡介
1、目的:探討Cu2+長期脅迫對(duì)黑水虻幼蟲血細(xì)胞的影響,為黑水虻無害化處理糞便技術(shù)的實(shí)施提供理論依據(jù)。
方法:以添加不同濃度Cu2+的人工飼料連續(xù)5代飼養(yǎng)黑水虻幼蟲,熒光顯微鏡下觀察第1、3、5代5齡幼蟲血細(xì)胞的形態(tài)變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測血細(xì)胞凋亡率;分光光度法檢測血淋巴中總糖、蛋白、脂肪含量和GSH-Px、GST、SOD活性及MDA含量。
結(jié)果:
(1)第1、3、5代黑水虻幼蟲血細(xì)胞均在Cu2+處理濃度為600
2、 mg/kg時(shí)出現(xiàn)凋亡小體,在1200 mg/kg處理濃度下,血細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)崩解壞死。
(2)第1、3、5代黑水虻幼蟲血細(xì)胞凋亡率均在Cu2+處理濃度為75 mg/kg時(shí)與對(duì)照相比顯著降低,在600-1200 mg/kgCu2+處理濃度下血細(xì)胞凋亡率隨飼料中Cu2+濃度的增加而增加,且顯著高于對(duì)照和其它處理組的凋亡率;第5代幼蟲在Cu2+濃度為150 mg/kg及以上處理濃度時(shí)血細(xì)胞凋亡率隨飼料中Cu2+濃度的增加而增加,且顯
3、著高于第1、3代幼蟲血細(xì)胞的凋亡率。
(3)150-1200 mg/kg處理濃度Cu2+脅迫均顯著降低了第5代黑水虻幼蟲(0-120 h)的血淋巴中總糖含量。第3代幼蟲血淋巴總糖含量除24 h在75-300 mg/kg處理濃度Cu2+脅迫下高于對(duì)照組含量外,其他處理濃度下各時(shí)間點(diǎn)血淋巴中總糖含量均隨飼料中Cu2+濃度的增加而減少。
(4)75-1200 mg/kg處理濃度Cu2+脅迫均顯著降低了第3、5代黑水虻幼蟲(
4、0-120 h)血淋巴中蛋白含量。除去第1代(0-120 h)幼蟲在各個(gè)處理濃度Cu2+脅迫下血淋巴中蛋白含量高于對(duì)照組含量外,其他世代、各時(shí)間點(diǎn)血淋巴中蛋白含量均隨飼料中Cu2+濃度的增加而減少。
(5)150-1200 mg/kg處理濃度Cu2+脅迫均顯著降低了第3、5代黑水虻幼蟲(0-120 h)血淋巴中脂肪含量。除去第1代幼蟲0 h和24 h各處理組外,第1、3、5代黑水虻幼蟲在150 mg/kg及以上處理濃度Cu2+
5、脅迫下(0-120 h)血淋巴中脂肪含量均隨飼料中Cu2+濃度的增加而減少。
(6)第1、3、5代黑水虻幼蟲血淋巴中GSH-Px活性均隨飼料中Cu2+濃度和脅迫世代的增加而降低。
(7)第1、3、5代黑水虻幼蟲血淋巴中SOD活性均隨飼料中Cu2+濃度的增加呈下降的趨勢且均低于對(duì)照組活性;300-1200 mg/kg處理濃度Cu2+脅迫下第3代幼蟲血淋巴SOD活性均顯著高于第1、5代幼蟲的活性。
(8)受不同
6、濃度Cu2+脅迫的第1、3、5代黑水虻幼蟲血淋巴中GST活性的變化沒有明顯規(guī)律性。
(9)第1、3、5代黑水虻幼蟲血淋巴中 MDA含量與飼料中 Cu2+濃度正相關(guān),且Cu2+處理濃度為1200 mg/kg時(shí)第1、3、5代黑水虻幼蟲血淋巴中MDA含量均顯著高于75 mg/kg處理組及對(duì)照組的MDA含量。
結(jié)論:
(1) Cu2+處理濃度為1200 mg/kg時(shí)可顯著誘導(dǎo)第1、3、5代黑水虻幼蟲血細(xì)胞的凋亡,且
7、細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)崩解壞死。
(2)150-1200 mg/kg處理濃度Cu2+脅迫均顯著降低了第5代黑水虻幼蟲(0-120 h)血淋巴中總糖、蛋白及脂肪含量,且均隨飼料中Cu2+濃度的增加而減少。
(3)隨飼料中Cu2+濃度的增加,第1、3、5代黑水虻幼蟲血淋巴中GSH-Px活性均降低,SOD活性呈下降的趨勢,GST活性變化沒有明顯規(guī)律性。
(4) Cu2+處理濃度為1200 mg/kg時(shí)可顯著誘導(dǎo)第1、3、5
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