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文檔簡介
1、通過物理和化學(xué)吸附,蛋白質(zhì)吸附到納米顆粒表面形成異質(zhì)體。異質(zhì)體的應(yīng)用范圍比較廣,包括生物傳感器、影像學(xué)、催化、醫(yī)療、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的研究等。納米顆粒表面的拓撲結(jié)構(gòu),例如:表面曲率、粗糙度、特定幾何形狀等,能影響蛋白質(zhì)的特定結(jié)構(gòu),進而影響到它的生物活性。在異質(zhì)體的研究中,常用的納米顆粒有:金納米顆粒(AuNPs)、銀納米顆粒(AgNPs)、親水性和疏水性的二氧化硅納米顆粒(SNPs)等;常用的蛋白質(zhì)有溶菌酶、細胞色素C、牛血清白蛋白和真
2、菌蛋白酶等分子量小的單聚體蛋白質(zhì)。納米顆粒對分子量比較大的二聚體蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和生物活性的影響,文獻上報道的較少。葡萄糖氧化酶(GOD)是一種分子量較大的二聚體蛋白質(zhì)。在食品、飼料、醫(yī)藥、生物傳感器等方面具有重要的應(yīng)用價值。1904年,人們便發(fā)現(xiàn)了GOD,其結(jié)構(gòu)和生物功能已經(jīng)比較清楚,GOD常被用作模型蛋白質(zhì)來進行科學(xué)研究。
本文主要研究了“裸露”的AuNPs大小和覆蓋率對GOD結(jié)構(gòu)和生物活性的影響。利用種子生長法合成了不同
3、大小的AuNPs,探究了還原劑的強弱對AuNPs單分散性的影響。在覆蓋率為80%的情況下,探究了不同大小的AuNPs對GOD結(jié)構(gòu)和活性的影響。此外,還探究了覆蓋率對GOD活性的影響。主要結(jié)論如下:⑴利用種子生長法,還原性弱的鹽酸羥胺作為還原劑合成的AuNPs單分散性明顯優(yōu)于還原性強的抗壞血酸合成的;利用種子生長法合成不同大小的AuNPs,要防止二次成核;半峰寬能用于比較同種方法合成的AuNPs單分散性的優(yōu)劣,不能用于不同方法合成的AuN
4、Ps單分散性的比較。⑵當(dāng)覆蓋率是80%時,“裸露”的AuNPs的大小能強烈地影響GOD的二級結(jié)構(gòu)和其活性中心黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)所處的微環(huán)境,進而影響到它的生物活性。13nmAuNPs導(dǎo)致了GOD的α螺旋含量減少;隨著AuNPs粒徑增大,其α螺旋含量增加;隨著AuNPs粒徑減小,GOD分子的色氨酸殘基向更加極性的環(huán)境移動,F(xiàn)AD微環(huán)境受到的擾動增大,對于52nm和76nm的AuNPs來說,上述改變是相近的;13nmAuNPs使G
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