青島近海魚類產(chǎn)鐵載體細菌多樣性研究.pdf

1、鐵載體是由微生物合成與分泌的一類可螯合環(huán)境中鐵離子的小分子化合物。在低鐵環(huán)境下，它有助于維持微生物的正常生命活動與促進多種生理代謝功能。由于海洋中可溶性鐵濃度較低，同陸地微生物相比海洋微生物更加需要鐵載體。
　　鐵元素在魚類體內(nèi)的代謝過程非常復雜，不僅魚類自身需要鐵，魚類體內(nèi)的各類微生物同樣也需要，這使得本就匱乏的鐵元素顯得更加珍貴。因此研究海魚體內(nèi)產(chǎn)鐵載體細菌的多樣性，對于我們了解復雜的海洋環(huán)境、海魚體內(nèi)的代謝平衡、以及海魚體內(nèi)

2、的鐵微生態(tài)環(huán)境都有著重要的意義。研究海魚體內(nèi)產(chǎn)鐵載體細菌的多樣性，也為今后研究、開發(fā)與利用海洋微生物資源，提供了重要的理論基礎。
　　本研究通過構建系統(tǒng)發(fā)育樹對分離于青島近海魚類的鐵載體高產(chǎn)菌16SrDNA序列進行分析鑒定，將53株菌分為5大類群9個屬15個種:其中Cobetiamarina有17株，占了鐵載體高產(chǎn)菌株總數(shù)32.07％;其次為Bacillusthuringiensis有5株，占了鐵載體高產(chǎn)菌株總數(shù)的9.43％;其他

3、菌種所占比例較小，都在8％以下;同時還發(fā)現(xiàn)，在不同海魚體內(nèi)，鐵載體高產(chǎn)菌的類群存在顯著差異。
　　通過高氯酸鐵實驗、氯化鐵實驗、Csaky實驗、Aronw實驗、硫酸銅全波長掃描實驗等對上述鐵載體高產(chǎn)菌所產(chǎn)鐵載體的類型多樣性進行了研究。研究發(fā)現(xiàn)，在53株菌中:有30株菌可以產(chǎn)生異羥肟酸類鐵載體;16株可以產(chǎn)生兒茶酚類鐵載體;7株可以產(chǎn)生羧酸類鐵載體;8株既可以產(chǎn)生異羥肟酸類鐵載體又可以產(chǎn)生兒茶酚類鐵載體;1株既可以產(chǎn)生異羥肟酸類鐵載

4、體又可以產(chǎn)生羧酸類鐵載體;1株既可以產(chǎn)生兒茶酚類鐵載體又可以產(chǎn)生羧酸類鐵載體。
　　菌株S-EH-1鑒定為Pseudoalteromonasnigrifaciens，它僅合成分泌異羥肟酸類鐵載體，鐵載體表達量73.253％，產(chǎn)量5.494mg/L，為鐵載體優(yōu)勢菌株。通過XAD-2大孔樹脂吸附，SephadexLH-20葡聚糖凝膠層析對菌株S-EH-1所產(chǎn)鐵載體進行分離純化。通過高效液相層析、電噴霧液質(zhì)聯(lián)用等方法，對鐵載體結構進行初