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文檔簡介
1、本實驗先對含連有纖溶酶基因的分泌型表達載體 pPIC9K的大腸桿菌DH5α活化后,提取質(zhì)粒,并將其轉(zhuǎn)入釀酒酵母菌中,得到一株含有纖溶酶基因的釀酒酵母菌,并對外源基因的表達和穩(wěn)定性做了分析。同時對重組釀酒酵母菌的發(fā)酵特性做了分析,主要比較了重組釀酒酵母菌與原始釀酒酵母菌在接種量、溫度、pH上的選擇和釀酒酵母菌的酒精耐受性、熱死滅溫度、凝聚性、發(fā)酵力的變化,分析轉(zhuǎn)入了纖溶酶基因?qū)︶劸平湍妇陌l(fā)酵能力是否產(chǎn)生影響。最后用重組釀酒酵母菌做啤酒發(fā)
2、酵試驗,檢測主發(fā)酵結(jié)束后發(fā)酵液中的纖溶酶含量,為生產(chǎn)具有降血脂溶栓功能的保健啤酒提供理論支持和依據(jù)。
研究結(jié)果表明,通過 PCR檢測證實纖溶酶基因已在釀酒酵母菌基因組內(nèi)整合,通過纖溶酶活性檢測進一步證實纖溶酶基因可在釀酒酵母菌體內(nèi)分泌和表達。在沒有選擇壓力的情況下,纖溶酶基因的遺傳穩(wěn)定性很好,5代內(nèi)都能穩(wěn)定傳代。
通過比較重組釀酒酵母菌與原始釀酒酵母菌在接種量、溫度、pH上的選擇,得到的結(jié)果:在接種量和pH值的選擇上
3、沒有很大的差異,在接種量為1%,pH值為4.5時,能達到最好的效果;在發(fā)酵溫度的選擇上存在差異,分別在30℃和28℃能達到最好的效果。由此看出,轉(zhuǎn)入了纖溶酶基因?qū)︶劸平湍妇诮臃N量、溫度、pH上的選擇差異不大。
通過比較重組釀酒酵母菌與原始釀酒酵母菌的酒精耐受性、熱死滅溫度、凝聚性、發(fā)酵力,得到的結(jié)果:酒精耐受性實驗中耐酒精能力均為12%;熱死滅溫度實驗中兩株菌的熱死滅溫度均為60℃;凝聚性試驗中,本斯值分別為1.4和1.3,
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