高效液相色譜法測定玉米赤霉烯酮的方法研究.pdf

1、背景及目的：玉米赤霉烯酮（ZEA）又稱F-2毒素，由禾谷鐮刀菌、三線鐮刀菌等真菌在玉米、小麥、谷物等生長過程中產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物，該毒素具有嚴重的生殖和發(fā)育毒性。ZEA毒性強，污染范圍廣，去除困難，嚴重影響農(nóng)作物產(chǎn)量，降低農(nóng)產(chǎn)品和飼料品質(zhì)，對人畜造成很大危害，構(gòu)成巨大經(jīng)濟損失，已引起廣大科研工作者極大關(guān)注，為此，聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織和世界衛(wèi)生組織已將解決ZEA問題做為當(dāng)務(wù)之急。我國居民以糧谷類為主食，同時我國也是糧食貿(mào)易大國，因此，

2、建立食品中ZEA的簡便快速、靈敏有效的檢測方法，對保護我國人民身體健康和糧食貿(mào)易中的經(jīng)濟利益有積極意義。 研究方法： 1．采用乙腈-水、乙腈-NaCl溶液超聲提取玉米樣品中ZEA，過濾后，以甲醇-水、乙腈-甲醇-水為流動相，熒光檢測-高效液相色譜法檢測ZEA，建立快速檢測玉米中ZEA的高效液相色譜法。 2．采用乙腈-NaCl溶液超聲提取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減壓濃縮，固相萃取柱凈化，熒光檢測-高效液相色譜法測定玉米中ZEA。

3、ZEA提取過程中主要討論了料液比、乙腈：NaCl溶液、NaCl濃度以及超聲提取時間對提取效果的影響；凈化條件主要研究了固相萃取柱的活化、溶解樣品的溶劑組成和比例、溶劑過固相萃取柱對凈化效果的影響；色譜條件討論了色譜柱、檢測器、檢測波長、流動相的選擇對檢測結(jié)果的影響。 結(jié)論： 1．樣品經(jīng)乙腈-水（9：1 V/V）提取，Agilent XDB C18柱分離，甲醇-水（7：3V/V）為流動相，檢測ZEA各項指標如下：標準曲線線

4、性回歸方程為Y=361．25X-1154．20，R2=0．9997，線性范圍為：20～1×104ng/ml；玉米樣品加標量為120μg/kg的回收率為87．0％～96．4％，日內(nèi)、日間相對標準偏差為5．8％、4．0％，方法檢測限為10μg/kg。 2．樣品經(jīng)乙腈-40g/LNaCl溶液（80：20 V/V）提取，Agilent XDB C18柱分離，乙腈-甲醇-水（46：8：46 V/V）為流動相，檢測ZEA各項指標如下：標準曲

5、線方程為Y=625．27X-2666．8，R2=0．9998，線性范圍為：20～1×104ng/ml；玉米樣品加標量為60、120、240μg/kg的回收率為81．8％～97．1％，日內(nèi)、日間相對標準偏差為1．9％～4．4％，方法檢測限為10μg/kg。 3．樣品經(jīng)乙腈-40g/LNaCl溶液（80：20 V/V）提取，固相萃取柱凈化，Agilent XDB C18柱分離，甲醇-水（65：35 V/V）為流動相，檢測ZEA各項指

6、標如下：標準曲線線性回歸方程為Y=442．91X+878．65，R2=0．9998，線性范圍為：20～1×104ng/ml；玉米樣品加標量為60、120、240μg/kg的回收率為78．2％～89．6％，日內(nèi)、日間相對標準偏差為1．5％～3．9％，該方法檢測限為10μg/kg。乙腈-甲醇-水（46：8：46 V/V）為流動相檢測，玉米樣品加標量為60、120、240μg/kg的回收率為78．5％～88．5％，日內(nèi)、日間相對標準偏差為2．